Liquid Chromatographic Separation of Sugars

Význam tématu

Carbohydráty jsou hlavní složkou potravin a nápojů, jejich kvantifikace a identifikace je klíčová pro kontrolu jakosti, nutriční značení a ověřování autenticity surovin.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat separaci osmi běžných cukrů v potravinách a nápojích, včetně epimerního páru glukózy a galaktózy, na systému Agilent 1290 Infinity III LC s ELSD detektorem.

Použitá metodika a instrumentace

• Zásadní chromatografický sloupec: Agilent ZORBAX Original 70Å Carbohydrate Analysis, 4.6 × 150 mm, 5 µm
• HPLC systém: Agilent 1290 Infinity III (pumpa G7120A, autosampler G7167B, termostat G7116B)
• Detektor: ELSD (G7102A), výparník 60 °C, tryska 90 °C, plyn 1.5 SLM
• Mobilní fáze: voda (A) a acetonitril (B), gradient 81 % B do 5.5 min, 60 % B do 13 min, průtok 1.5 mL/min
• Příprava standardů: 10 mg/mL stock, kalibrace 0.1–10 mg/mL
• Software: Agilent OpenLab CDS v. 2.8

Hlavní výsledky a diskuse

• Úspěšná separace osmi cukrů během 13 min, včetně glukózy a galaktózy
• LOQ 0.03–0.11 mg/mL (S/N ≥ 10)
• Kalibrační křivky s R2 > 0.998 (log/log model) potvrzují linearitu
• Opakovatelnost: RT RSD < 0.2 %, plocha RSD < 2 % (N = 6)

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlou, citlivou a opakovatelnou analýzu cukrů, vhodnou pro kontrolu jakosti, nutriční značení a ověřování autenticity. Gradientní eluce s ELSD výrazně zkracuje dobu analýzy oproti RID.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro identifikaci neznámých sacharidů
• Využití UHPLC pro další zkrácení analýz
• Automatizace přípravy vzorků a online vzorkování
• Analýza modifikovaných a vysokomolekulárních sacharidů

Závěr

Studie potvrdila robustnost a citlivost metody pro separaci osmi klíčových cukrů včetně epimerního páru glukóza/galaktóza, s nízkými LOQ, vynikající linearitou a opakovatelností.

Reference

1. Debebe A., Temesgen S., Redi-Abshiro M., Chandravanshi B. S., Ele E. Improvement in Analytical Methods for Determination of Sugars in Fermented Alcoholic Beverages. Journal of Analytical Methods in Chemistry 2018, doi:10.1155/2018/4010298.