HPLC, Spotřební materiál, LC kolony
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceThermo Fisher Scientific
Význam tématu
Kontrola reziduí sulfonamidových antibiotik v mléce je zásadní pro zajištění bezpečnosti potravin a dodržení stanovených maximálních limitů. Nevhodné hladiny těchto látek mohou vést k rozvoji bakteriální rezistence, alergickým reakcím u spotřebitelů a neprojdou při oficiálních kontrolách. Zavedení efektivní a rychlé analytické metody umožňuje spolehlivou detekci více sloučenin současně a zvyšuje propustnost laboratoří.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem studie bylo vyvinout a validovat jednorozběhovou HPLC-UV metodu pro separaci a kvantifikaci osmi běžných sulfonamidů v mléčných vzorcích. Metoda využívá vysokorozlišovací kolonu Thermo Scientific™ Acclaim™ 120 C18 a gradientní eluci, čímž nahrazuje konvenční postup vyžadující dvě injekce s různými mobilními fázemi.
Použitá metodika
Vzorky jsou připraveny podle postupu AOAC 993.32 zahrnující extrakci a čistění mléka.
Chromatografické podmínky:
- Kolona: Acclaim 120 C18, 5 μm, 4,6 × 250 mm
- Mobilní fáze A: 30 mM octová kyselina pH 4,2; B: methanol
- Gradient: 0–20 min z 88 % A / 12 % B na 60 % A / 40 % B, do 25 min udržení
- Průtok: 1,5 mL/min
- Teplota: 35 °C
- Detekce: UV při 265 nm se spektrálním potvrzením
- Objem injekce: 100 μL
Použitá instrumentace
- Pumpa: Thermo Scientific™ Dionex™ Summit P580 HPG/4
- Autosampler: ASI-100, objem injekce 100 μL
- Detektor: UVD 340U, UV 265 nm
- Kolona: Acclaim 120 C18 (5 μm, 4,6 × 250 mm)
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda umožnila rozlišení všech osmi sulfonamidů během 25 minut v jediné injekci. Klíčové body:
- Retenční časy analyzovaných sloučenin se pohybují od přibližně 6 do 23 minut.
- Interference organických kyselin byly potlačeny úpravou pH mobilní fáze.
- U spikovaných vzorků mléka (1,0 μg/g) byla dosažena dostatečná citlivost a selektivita pro všechny analyty.
- Vedlejší píkem je teobromin, označený hvězdičkou, který nekoliduje s hlavními anality.
Přínosy a praktické využití metody
Navržená metoda přináší:
- Úsporu času a zvýšení laboratorní efektivity díky jediné chromatografické běhu.
- Spolehlivou detekci a kvantifikaci osmi sulfonamidů současně.
- Snadnou integraci do QA/QC protokolů a oficiálních kontrol mléka.
- Omezení interference matricových látek úpravou pH.
Budoucí trendy a možnosti využití
Metodu lze dále rozvíjet:
- Integrace hmotnostní detekce (LC–MS) pro nižší meze detekce a širší screening reziduí.
- Automatizace přípravy vzorků pro zvýšení propustnosti.
- Rozšíření aplikace do dalších mléčných a potravinářských matric.
- Vývoj multi-reziduálních metod kombinujících různé třídy antibiotik.
Závěr
Použití vysoce výkonné Acclaim 120 C18 kolony s gradientní elucí umožnilo efektivní jednorozběhovou analýzu osmi sulfonamidových antibiotik v mléce. Metoda přináší vysokou selektivitu, dostatečnou citlivost a zefektivnění laboratorních procesů.
Reference
- AOAC INTERNATIONAL. Official Method 993.32. Milk – Sulfonamides.
- Thermo Fisher Scientific Inc. Application Note 21533, 2009.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
