Beta-agonists in Pork Using In-line SPE

Význam tématu

Analýza beta-agonistů v mase je klíčová z hlediska bezpečnosti potravin a dodržování anti-dopingových předpisů. Tyto sloučeniny se nelegálně používají jako růstové promotery v chovu dobytka a mohou způsobit otravy u spotřebitelů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout rychlou a citlivou metodu pro stanovení pěti beta-agonistů (salbutamol, cimaterol, ritodrin, ractopamin, clenbuterol) v mase vepře. Použití in-line SPE umožňuje automatizované čištění vzorku a koncentraci analytů bez manuálního odpařování.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorková příprava: 5 g vepřové kýty extrahováno ASE (4:1 acetonitril:isopropanol), ochlazeno, odfiltrováno.
• In-line SPE: Thermo Acclaim Mixed-Mode WCX-1 guard cartridge (3,0 × 10 mm) pro kationtovou výměnu.
• Analytická kolona: Thermo Scientific Acclaim C30 3 µm, 2,1 × 150 mm.
• HPLC systém: Thermo Dionex UltiMate 3000 RSLC s duálním gradientem.
• Mobilní fáze: levý pump A – methanol; B – 5 mM formiát amonný pH 7,5; pravý pump A – acetonitril; B – voda; C – 12,5 mM formiát amonný + 50 mM kyselina mravenčí pH 3,1.
• Gradientní program a rychlost 0,4 mL/min na každé větvi.
• Injekce 100 µL, detekce DAD při 210 nm, 2 Hz.

Hlavní výsledky a diskuse

On-line SPE efektivně odstranilo lipidy a další interferenty, přičemž beta-agonisty byly kvalitně koncentrovány a převedeny na analytickou kolonu. Všechny pět analyzovaných látek bylo separováno s dobrým rozlišením do 15 minut. Metoda poskytuje reprodukovatelné retence a dostatečnou citlivost pro detekci na úrovni µg/kg.

Přínosy a praktické využití metody

• Automatické čištění a koncentrace bez nutnosti ručního odpařování.
• Rychlá analýza (celkový čas pod 15 minut) a nízká spotřeba rozpouštědel.
• Vysoká selektivita díky kombinaci kationtové výměny a RP-HPLC.
• Vhodné pro rutinní potravinářské kontroly a anti-dopingová testování.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další skupiny veterinárních léčiv a hormonálních regulátorů.
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro nižší limity detekce a další potvrzení identity.
• Vývoj multi-analyzátorových platforem pro paralelní screening.
• Plná automatizace vzorkové přípravy v rámci integrovaných systémů.

Závěr

Popisovaná metoda in-line SPE-RP-HPLC-UV je rychlá, citlivá a selektivní pro detekci beta-agonistů v mase vepře. Automatizace přípravy vzorků zvyšuje reproducibilitu a eliminuje komplikace spojené s manuálním odpařováním, což ji činí ideální pro regulérní kontrolní laboratoře.

Reference

• Thermo Fisher Scientific Application Note PB20646_E, 2012.
• U.S. Department of Agriculture, Clenbuterol Agonists Testing, 2003.