Analyzing cannabis flowers according to the German Pharmacopeia - monograph 2018

Význam tématu

Cannabis sativa L. se v posledních letech stal klíčovou surovinou pro přípravu léčivých přípravků. S novelou německého zákona o omamných látkách v roce 2017 vzrostla potřeba přesných a reprodukovatelných metod pro stanovení obsahu kanabinoidů. Vyhovění monografii Deutsches Arzneibuch 2018 je nezbytné pro zajištění kvality, bezpečnosti a správného označování léčivých konopných produktů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo implementovat a ověřit HPLC metodu uvedenou v DAB 2018 pro kvantifikaci šesti hlavních kanabinoidů (CBDA, CBD, CBN, Δ8-THC, Δ9-THC, Δ9-THCA) na systému KNAUER AZURA® HPLC plus. Metoda byla validována stanovením opakovatelnosti a porovnáním relativních retenčních časů s monografií. Jako vzorek k ověření byla použita autorizovaná léčebná květina bediol.

Použitá metodika

• Příprava vzorku: 500 mg mletého materiálu bediol extrahováno třikrát 15 mL ethanolu za podmínek 15 min míchání a následné centrifugace.
• Diluce: směs extraktů sjednocena ve 50 mL, dále zředěna 1:10 a filtrována přes 0,45 µm RC filtr.
• Chromatografie: kolona Eurospher II C18P 100-3, 150×3 mm, teplota 40 °C, detekce UV 225 a 306 nm, gradientní eluce s vodou (pH úprava H3PO4) a acetonitrilem, průtok 1,0 mL/min, doba analýzy 20 min.

Použitá instrumentace

• Pumpa P 6.1 L
• Detektor MWD 2.1 L
• Autosampler AS 6.1 L
• Termostat CT 2.1
• Kolona Eurospher II C18P 100-3, 150×3 mm
• Software Clarity Chrom 8.1

Hlavní výsledky a diskuse

• Kritické rozlišení Δ8-THC a Δ9-THC dosáhlo hodnoty R=1,3 (požadavek DAB >1,2).
• Opakovatelnost pro pět kanabinoidů byla lepší než 1 % RSD.
• Naměřené relativní retenční časy se shodovaly s hodnotami DAB v rozmezí ±0,03.
• Neidentifikované píky byly interpretovány jako produkty matice nebo méně běžné kanabinoidy.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje robustní nástroj pro rutinní kontrolu jakosti léčebného konopí. Umožňuje farmaceutům, laboratorním technikům a regulačním orgánům spolehlivě kvantifikovat hlavní kanabinoidy a zajistit dodržení legislativních norem.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody o další kanabinoidy a terpeny.
• Integrace hmotnostní detekce (LC-MS) pro zvýšení citlivosti a selektivity.
• Automatizace přípravy vzorků v souladu s GMP.
• Vytvoření databází retenčních a spektroskopických údajů pro rychlou identifikaci vzorků.

Závěr

Implementovaná HPLC metoda splňuje požadavky monografie DAB 2018 a nabízí rychlé, přesné a reprodukovatelné stanovení šesti hlavních kanabinoidů v léčebném konopí. Prokázaná opakovatelnost a správné rozlišení klíčových analytů zajišťují její praktické využití v kontrolách kvality.

Reference

1. Betäubungsmittelgesetz (BtMG), 1981.
2. Deutsches Arzneibuch 2018: Monografie Cannabisblüten‐Cannabis flos.
3. Hoch E., Friemel C. M., Schneider M. Cannabis. Springer, 2018.
4. Grotenhermen F. Endogene Cannabinoide und das Endocannabinoidsystem. In: Handbuch Psychoaktive Substanzen, 2018.
5. Smith B. C. Inter‐lab variation in the cannabis industry. Cannabis Sci. Technol. 2019.
6. Loxterkamp L., Monks K. Analyzing cannabis flowers according to the German Pharmacopeia, 2019.