Big Tuna

Význam tématu

Automatizovaná výměna pufrů a koncentrace vzorků představují klíčové kroky v přípravě biologických vzorků, které bývají časově náročné a náchylné k chybám. Platforma Big Tuna umožňuje tyto procesy zefektivnit, zkrátit dobu práce a zvýšit reprodukovatelnost výsledků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem prezentovaného materiálu je představit plně automatizovanou platformu Big Tuna pro vysokopropustnou výměnu pufrů a koncentraci vzorků, zejména proteinů a vektorů pro genovou terapii (AAV, LNP, VLP). Materiál popisuje klíčové funkce, provozní režimy a výkonnostní parametry zařízení.

Použitá metodika a instrumentace

• Platforma Big Tuna s možností zpracování 24 nebo 96 vzorků paralelně (Unfilter 24 a Unfilter 96)
• Ultrafiltrační/diafiltrační proces založený na tlakové filtraci a jemném míchání
• Akustický senzor pro přesné měření objemu v každé jamce před a po cyklu
• Softwarový průvodce s intuitivním rozhraním a SILA-2 API pro integraci do automatizačních systémů a LIMS
• Regenerovaná celulóza s molekulárními cut-off 3, 10, 30 a 100 kDa pro Unfilter 96 a 10, 30 a 100 kDa pro Unfilter 24

Hlavní výsledky a diskuse

Platforma dosahuje vysoké efektivity vyměny pufrů i koncentrace:

• Objem výměny: 100–450 µl (Unfilter 96) a 0,45–8 ml (Unfilter 24)
• Čas vyměny (96 %, 10 mg/ml IgG): 3 hodiny pro Unfilter 96, 4,5 hodiny pro Unfilter 24
• Přesnost cílové koncentrace: ± 10 %
• Obnova vzorků: ≥ 96 %
• Maximální koncentrace proteinů: až 200 mg/ml

Díky kontinuálnímu měření objemu a automatickému dávkování pufru je zajištěna rovnoměrná výměna v celé destičce. Systém také umožňuje koncentraci vzorků z původních objemů až 48 ml na 8 ml.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zkrácení doby přípravy vzorků a snížení manuální práce pod 15 minut nastavení
• Vysoká propustnost a paralelní zpracování až 96 vzorků
• Široká kompatibilita se vzorky pro genovou terapii a proteiny
• Snadná integrace s automatizačními linkami a LIMS díky otevřenému API
• Reprodukovatelné podmínky a vysoká návratnost

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření platformy o nové formáty membrán, vylepšené senzory a pokročilé softwarové funkce pro prediktivní řízení procesů. Další integrace s robotickou automatizací a využití strojového učení pro optimalizaci protokolů může dále zvýšit efektivitu a reprodukovatelnost.

Závěr

Big Tuna představuje inovativní řešení pro automatizovanou výměnu pufrů a koncentraci vzorků, které významně zrychluje laboratorní workflow, zvyšuje reproducibilitu a usnadňuje integraci do moderních automatizačních systémů.