Oasis™ PRiME HLB Solid Phase Extraction for High Bioanalytical Plasma Analyte Recovery and Low Matrix Effects of Top-Selling Pharmaceuticals

Význam tématu

Bioanalytické stanovení léčiv v plazmě je klíčové pro farmakokinetické studie, monitorování léčby i vývoj nových léčiv. Kvalitní vzorkovací příprava minimalizuje maticové interferenty, zejména fosfolipidy, a usnadňuje citlivou a přesnou kvantifikaci pomocí LC-MS/MS.

Cíle a přehled článku

Autoři prezentují univerzální SPE protokol založený na sorbentu Oasis PRiME HLB pro extrakci několika nejprodávanějších malých molekul v roce 2023. Cílem je ukázat, že bez jakékoliv metodylfvního vývoje lze dosáhnout vysokého výtěžku analytů, nízkých maticových efektů a čistých eluátů připravených k rychlé LC-MS/MS analýze.

Použitá metodika a instrumentace

Bioanalytická příprava vzorků:

• Oasis PRiME HLB 96-well µElution SPE destička
• Jednoduchý 3-krokový protokol: načtení plazmy, promytí, eluční krok

LC-MS/MS analýza:

• UPLC systém ACQUITY I-Class Plus s ACQUITY UPLC HSS T3 kolonkou (2,1×30 mm, 1,8 µm)
• Mobilní fáze: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě a v acetonitrilu
• Gradient 3min: od 10 % do 90 % organiky
• MS: Xevo TQ-XS Triple Quadrupole s ESI, MRM režim

Podmínky:

• Kolonka 35 °C, vzorek 10 °C, injekce 10 µl
• Desolvatace 500 °C, průtok 1100 L/h

Hlavní výsledky a diskuse

Výsledky extrakce a analýzy ukazují:

• Výtěžky analytů ≥ 80 %
• Redukce fosfolipidů o více než 90 % oproti tradičním metodám
• Celkové maticové efekty ≤ 15 % (ionizační potlačení/enhance)
• LLOQ 0,91 ng/ml, ULOQ 250–1000 ng/ml dle analytu
• Linearita kalibračních křivek r² > 0,99, přesnost ± 15 %
• Analýza jednoho vzorku za 3 minuty

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Minimální nároky na vývoj a optimalizaci
• Rychlou přípravu (< 30 min) v 96-well formátu
• Čisté eluáty s nízkými maticovými interferencemi
• Vhodnost pro vysokopropustné bioanalytické laboratoře

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směry rozvoje:

• Automatizace SPE workflow a on-line integrace s UPLC
• Použití sorbentů pro specifickou selektivitu dalších tříd látek
• Implementace high-resolution MS a datově řízených metod
• Ekologické varianty mobilních fází a sorbentů

Závěr

Oasis PRiME HLB SPE představuje univerzální, rychlý a spolehlivý přístup pro extrakci různorodých malých molekul z plazmy. Díky jednoduchému protokolu a výborné analytické výkonnosti (vysoký výtěžek, nízké maticové efekty) je metoda ideální pro moderní bioanalytiku a farmakokinetické studie.

Reference

• Williams RE, Leatherwood HM. Top 200 Small Molecule Drugs by Retail Sales in 2023. 2024.
• Drugbank Online. DB00480. 2024.
• Zhang X, Danaceau JP, Chambers EE. Improvements in Recovery, Reproducibility, and Matrix Effects with Oasis PRiME HLB. Waters App. Note 720005495, 2015.
• Danaceau JP, Trudeau ME. Automated Bioanalytical Sample Preparation for LC-MS Quantification of Apixaban. Waters App. Note 720007946, 2023.
• Rahim F, VanTran K, Trudeau ME. Bioanalytical Sample Extraction for Lenalidomide Using Oasis MCX SPE. Waters App. Note 720008140, 2023.