Determination of nitrite in pharmaceuticals

Význam tématu

N-nitrosodimethylamin (NDMA) patří mezi známé karcinogenní látky, které se mohou vznikat z nitritů v přítomnosti sekundárních či terciárních aminů. Výskyt NDMA v léčivech jako losartan, ranitidin či metformin vedl k rozsáhlým zpětným odběrům a posílení regulačních požadavků. Spolehlivé stanovení nitritů je proto klíčové pro hodnocení rizika vzniku nitrosaminů během farmaceutické výroby.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této studie bylo navrhnout, validovat a aplikovat iontově chromatografickou metodu s UV detekcí pro kvantifikaci nitritů v surovinách a hotových lékových formách. Metoda využívá reagent-free generaci eluentu a sekvenční potlačenou vodivost společně s UV absorpcí při 210 nm.

Použitá metodika a instrumentace

• Reagent-Free IC systém Thermo Scientific Dionex ICS-6000 HPIC
• Iontovýměnná kolona Dionex IonPac AS19-4 µm (2 × 250 mm) s předkolonou AS19-4 µm (2 × 50 mm)
• Eluent: elektrolyticky generovaný KOH (20 → 60 → 20 mM) z cartridge EGC 500 a trap column CR-ATC 600
• Suppressor: ADRS 600 (recirkulační režim, 38 mA)
• Detekce: sekvenční potlačená vodivost a UV absorbance 210 nm
• Software: Chromeleon CDS verze 7.2.10

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje meze detekce 0,918 µg/L (0,918 ppm při přípravě 1 mg/mL API, S/N = 3) a kvantifikační meze S/N = 10. Kalibrace nitritu je lineární v rozsahu 5–500 µg/L (r2 = 0,9999). Celková doba analýzy činí 30 min, objem injekce 25 µL, průtok 0,25 mL/min. Nitroti byl detekován ve šesti ze sedmi testovaných vzorků v rozmezí 4,45–95,5 µg/g API. Spike recovery studie ukázaly hodnoty 96,3–101 % a opakovatelnost RSD < 3 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká selektivita UV detekce, tedy odolnost vůči velkému obsahu chloridů
• Minimální příprava vzorku bez nutnosti derivatizace
• Rychlá aplikace v QA/QC laboratořích pro průběžný monitoring nitrosaminů
• Možnost sledovat nitrity v surovinách i hotových lékových formách během vývoje i výrobního procesu

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení selektivity a citlivosti
• Rozšíření metody na další anionty a aminy spojené s nitrosaminovými riziky
• Automatizace přípravy vzorků a online vzorkování pro vyšší propustnost
• Vývoj mikrofluidních systémů pro miniaturizaci a spreagmentaci chemikálií

Závěr

Použitá RFIC-UV metoda pro stanovení nitritů v léčivech prokázala vysokou přesnost, opakovatelnost a robustnost. Díky jednoduché přípravě vzorku a selektivní detekci je vhodná pro rutinní kontrolu kvality a hodnocení rizika nitrosaminů ve farmaceutickém průmyslu.

Reference

1. Concise International Chemical Assessment Document: N-Nitrosodimethylamine, WHO.
2. U.S. EPA IRIS: N-Nitrosodimethylamine.
3. FDA voluntary recall of valsartan products.
4. FDA updates on NDMA in Zantac (ranitidine).
5. Mylan voluntary recall of nizatidine due to NDMA.
6. FDA updates on NDMA in metformin.
7. FDA Guidance: Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs.
8. USP <1469> Nitrosamine Impurities Prospectus.
9. Mirvish SS, Toxicol Appl Pharmacol, 1975.
10. Ashworth IW et al., Org Process Res Dev, 2020.
11. Thermo Scientific TN74093: IC methods for amines in pharmaceuticals.
12. Dionex ICS-6000 HPIC Operator’s Manual, Thermo Scientific, 2018.
13. ICH Q2B: Validation of Analytical Procedures, 1996.