Newcrom A and B

Význam tématu

Chromatografie založená na kombinaci reverzní fáze a iontové výměny představuje flexibilní platformu pro separaci širokého spektra analytů od polárních iontů až po nepolární neutralní látky. Nová generace stacionárních fází Newcrom nabízí rovnoměrné elektrostatické i hydrofobní interakce, eliminuje nežádoucí silanolové účinky a dovoluje provoz v čisté vodě i v čistém organickém rozpouštědle. S rostoucí potřebou analýzy komplexních biochemických či průmyslových směsí je taková metodologie klíčová pro moderní laboratoře i výzkum.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem dokumentu je představit rodinu kolonek Newcrom (A, AH, B, BH) navržených společností SIELC Technologies. Autoři popisují chemickou strukturu ligandů s terminálními iontově výměnnými skupinami na dlouhých flexibilních řetězcích, demonstrují jejich výhody při separacích iontů i neutrálů a ukazují možnosti ladění retence změnou složení mobilní fáze. Studie porovnává Newcrom s tradičními iontově výměnnými a C18 fázemi.

Použitá metodika a instrumentace

Analýzy byly provedeny na HPLC soustavě vybavené UV detektorem (210–286 nm), CAD detektorem a rozličnými Newcrom kolonkami (4,6×150 mm, 3,2×100 mm, vlákna 3–5 μm, póry 100 Å). Jako mobilní fáze byly použity směsi MeCN/H2O, MeOH/H2O s buffery H3PO4, HCOOH, H2SO4, AmFm, AmAc v koncentracích 0,1–60 mM. Pro studium iontové kapacity byly srovnávány verze s nízkou (A, B) a vysokou (AH, BH) kapacitou.

Hlavní výsledky a diskuse

• Umístění iontových skupin na koncích dlouhých ligandů zajišťuje rovnoměrnou interakci s jednochargovanými i vícichargovanými analyt y a vede k symetričtějším píkům oproti klasickým fázím.
• Mixed-mode průběh retence závisí na dvou dimenzích: koncentraci organického modifikátoru (ovlivňuje hydrofobní interakci) a koncentraci či pH bufferu (ovlivňuje iontovou výměnu).
• Nejsou pozorovány jevy dewettingu ani při použití 100 % vody či 100 % organiky díky polárně nabitým funkčním skupinám.
• V modelových směsích aromatických kyselin, aminokyselin, nukleových bází, vitaminů, aminů a iontů Newcrom nabídly vyšší selektivitu a lišící se elucionní pořadí pouhými změnami mobilní fáze.
• Mixed-mode kolony umožňují dvourozměrnou chromatografii bez nutnosti sekvenčních kolonek či složitých modifikací.

Přínosy a praktické využití metody

• Univerzální separace polárních, nabitých i nepolárních molekul na jedné koloně.
• Rychlé přizpůsobení metody změnou objemu MeCN/MeOH a síly bufferu.
• Kompatibilita s MS díky použití těkavých pufrů (HCOOH, AmFm, AmAc).
• Minimalizace nežádoucích silanolových a dewetting efektů.
• Dvourozměrné rozlišení komplexních směsí (hydrofobní vs. elektrostatická dimenze).

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další vývoj kolonkových materiálů s cílenou selektivitou, integrace mixed-mode technik do ultrarychlých a mikro-/nano-HPLC systémů, rozšíření MS-MS aplikací a automatizace komplexních dvourozměrných protokolů. Dále je možnost využít Newcrom fáze v oblasti biofarmacie, metabolomiky či environmentálních analýz.

Závěr

Newcrom mixed-mode kolony představují pokrok v kombinaci reverzní fáze a iontové výměny. Díky umístění nabitých skupin na koncích dlouhých ligandů zajišťují rovnoměrné elektrostatické interakce, široký rozsah mobilních fází a stabilní výkon bez dewettingu. Jsou ideální pro univerzální chromatografii komplexních směsí s minimem úprav metody.

Reference

Žádné uvedené.