Příprava vzorků
ZaměřeníOstatní
VýrobceAgilent Technologies
Význam tématu
Automatizované přenosy kapalin jsou nezbytné pro zvýšení výkonnosti moderních laboratoří, minimalizaci lidských chyb a dosažení konzistentní přesnosti a preciznosti pipetování zejména při nízkých objemech.
Cíle a přehled studie
Cílem přehledu bylo stanovit přesnost (shoda s požadovaným objemem) a preciznost (variabilita výsledků) platformy Agilent Bravo vybavené 384-kanálovou hlavou ST s 70μl jednorázovými špičkami v rozsahu 0,75–5 μl.
Použitá instrumentace
- Agilent Bravo Automated Liquid Handling Platform
- 384-kanálová ST hlava s 70μl jednorázovými špičkami (p/n 19133-102)
- Ruční zásobník na kapalinu pro 384-jamkové destičky (p/n G5498B/G#050)
- 384-jamkové ploché polystyrenové destičky (Greiner 781101)
- Tartrazin 0,25 % (hmotnostně/objemově) v DMSO
- UV/Vis spektrofotometr s filtrem 405 nm
Metodika
Do zásobníku se nalila tartrazinová roztok a na definovaných deck pozicích Bravo vzalo špičky a aspirací 6 mm od dna odebralo 0,75, 1,0 nebo 5,0 μl roztoku. Parametry předaspirace (0,5 μl u nízkých objemů a 2 μl u 5 μl) a pomalé výtahy (0,05 mm/μl a 0,1 mm/μl) minimalizovaly napěnění. Po výtoku byl proveden výfuk (blowout) 0,5 μl nebo 2 μl. Obsah jamky se doředil na 50 μl vodou, destičky se odstředily (1 800 ot./min, 60 s) a absorbance při 405 nm se použila k výpočtu objemu podle kalibrační křivky.
Hlavní výsledky a diskuse
- 0,75 μl: preciznost 2,7 % CV, přesnost ±2,7 %, 54 % jamkových hodnot mimo limit 5 % a 3 % mimo 10 %
- 1,0 μl: preciznost 2,3 % CV, přesnost ±1,0 %, 33 % mimo 5 %
- 5,0 μl: preciznost 0,9 % CV, přesnost ±0,8 %, žádné hodnoty mimo 5 %
- Přenosová doba na destičku: 28 s pro 0,75 a 1,0 μl, 40 s pro 5,0 μl
Výsledky potvrzují, že Bravo s 384ST hlavou dosahuje konzistentních parametrů i na dolní hranici praktického objemu.
Přínosy a praktické využití metody
Metoda umožňuje rychlé a přesné pipetování desítek až stovek vzorků v nízkých objemech, což je klíčové pro kompozitní transfery látek, genomické aplikace, přípravu vzorků pro HPLC či hmotnostní spektrometrii a automatizované buněčné testy.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se další miniaturizace assay, integrace s mikrofluidními moduly, využití umělé inteligence pro optimalizaci liquidních tříd, rozšíření na vícekanálové kombinace a širší nasazení v celulárních a proteomických platformách.
Závěr
Agilent Bravo s 384-kanálovou ST hlavou a 70μl špičkami prokázal vysokou přesnost a preciznost při pipetování v rozsahu 0,75–5 μl. Díky variabilnímu uspořádání deků a rychlé výměně hlav je platforma ideální pro vysoce propustné a náročné laboratorní workflow.
Reference
- Holman JW, Mifflin TE, Felder RA, Demers LM. Evaluation of an automated preanalytical robotic workstation at two academic health centers. Clin Chem. 2002 Mar;48(3):540-8.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.