ASSESSMENT OF MASSTRAK IMMUNOSUPPRESSANT CALIBRATOR AND CONTROL SETS: CONFIDENCE IN YOUR CALIBRATORS

Význam tématu

Přesné stanovení imunosupresivních léčiv v krevním séru je zásadní pro optimalizaci individuální terapie po transplantaci orgánů a minimalizaci nežádoucích účinků. Tradiční imunotesty totiž vykazují omezenou specifičnost, zejména při nízkých koncentracích a za přítomnosti metabolitů. LC-MS/MS se proto stává preferovanou metodou díky lepší selektivitě a citlivosti.

Cíle a přehled studie / článku

Studie hodnotí sadu MassTrak Immunosuppressant Calibrator and Control Sets od Waters Corporation. Cílem je ověřit metrologickou stopovatelnost, reprodukovatelnost mezi výrobními šaržemi, analytickou citlivost, přesnost a časovou úsporu oproti přípravě vlastních kalibrátorů.

Použitá instrumentace

• 96-jámková mikrodestička pro přípravu vzorků (50 µl celkové krve)
• Centrifuga na 4969 g po přidání roztoku 0,1 M zinečnaté sírany (200 µl) a interního standardu (500 µl)
• Kolona Waters ACQUITY UPLC HSS C18 SB (2,1 × 30 mm)
• Systém Waters ACQUITY UPLC I-Class FL
• Mass-spektrometr Waters Xevo TQ-S micro s pozitivní ESI a režimem MRM
• Gradient mobilní fáze voda/methanol/ammonium acetate/kyanovodíková kyselina, doba injekce 1,9 min

Hlavní výsledky a diskuse

• Chromatografická separace cyklosporinu, everolimu, sirolimu a takrolimu s vysokou selektivitou
• Citlivost: poměr signál/šum (PtP) pro nejnižší kalibrační bod >10
• Lineární rozsahy se středními hodnotami r² >0,999
• Celková přesnost a opakovatelnost (5 dnů, 25 měření) s CV ≤7,1 %
• Přesnost QC vzorků vůči certifikovaným hodnotám 94,5–103,6 %
• Bias měřený na EQA vzorcích v rámci ±7,4 %

Přínosy a praktické využití metody

• Okamžitá dostupnost metrologicky stoprocentně stopovatelných kalibrátorů a QC vzorků
• Úspora času a zdrojů eliminací přípravy vlastních standardů (viz klíčové kroky v tabulce 1)
• Konzistentní výsledky mezi různými šaržemi podporují dlouhodobou stabilitu a srovnatelnost dat
• Splnění požadavků normy ISO 15189

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření portfolia stopovatelných kalibrátorů na další terapie vyžadující monitorování
• Automatizace přípravy vzorků a online QC sledování kvality měření
• Multiplexní analýzy pro současné stanovení širšího spektra léčiv
• Integrace výsledků do digitálních platform a pokročilá statistická kontrola kvality

Závěr

MassTrak Immunosuppressant Calibrator and Control Sets poskytují laboratorím rychlou, přesnou a reprodukovatelnou alternativu k vlastní přípravě kalibrátorů. Výsledky potvrzují vysokou citlivost, linearitu i opakovatelnost metody LC-MS/MS a podporují dodržování standardů kvality v klinické praxi.

Reference

• L. Calton, S. Balloch, G. Hammond. Assessment of MassTrak Immunosuppressant Calibrator and Control Sets: Confidence in Your Calibrators. Waters Corporation, 2023.
• LGC EQA samples for cyclosporine, everolimus, sirolimus and tacrolimus.