Transfer of a compendial LC method for impurity analysis of chlorhexidine from a Waters Alliance HPLC system to a Vanquish Core HPLC system

Význam tématu

Chlorhexidin je široce používané antiseptikum v medicíně i v každodenní hygieně, uplatňuje se například v ústních vodách a přípravcích pro dekontaminaci kůže. Analýza jeho nečistot podle monografie Evropské farmakopeje je klíčová pro zajištění kvality a bezpečnosti léčivých a zdravotnických přípravků. Přenos ověřené HPLC metody mezi různými zařízeními usnadňuje standardizaci procesů a šetří čas při validaci.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo demonstrovat bezproblémový přenos kompendiální metody pro stanovení nečistot chlorhexidinu z HPLC systému Waters Alliance na novější Thermo Scientific Vanquish Core. Studie porovnala chromatografické parametry obou zařízení při zachování podmínek monografie EP a sledovala shodu retenčních časů, rozlišení a opakovatelnost.

Použitá instrumentace

• Waters Alliance Quaternary HPLC systém: Separation Module 2695, PDA detektor 2996
• Thermo Scientific Vanquish Core Quaternary: Pump C, Split Sampler CT, Column Compartment C, Diode Array Detector CG
• Sloučené komponenty příslušenství: Method Transfer Kit Vanquish, standardní 10 mm flow cell (11 µL)
• Kolona: Thermo Scientific Hypersil GOLD C18 4,6×250 mm, 5 µm, 175 Å
• Software pro zpracování dat: Thermo Scientific Chromeleon 7.3

Použitá metodika

Mobilní fáze A byla složení 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (80/20, v/v), fáze B 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (10/90, v/v). Gradient začínal na 0 % B, po 32 min 20 % B, po 47 min 30 % B, návrat na 0 % B do 62 min; průtok 1 mL/min. Teplota kolony i autosampleru byla nastavena na 30 °C resp. 8 °C, detekce se prováděla při 254 nm s šířkou pásma 6 nm, sběr dat rychlostí 5 Hz, objem injekce 10 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

Retenční časy hlavního analytu a 21 nečistot se mezi systémy lišily méně než o 4 %. Relativní retenční časy odpovídaly hodnotám uvedeným v monografii EP. Vanquish Core dosáhl obvykle užších píků a vyššího rozlišení (~8 vs ~8) s výrazně lepší opakovatelností: RSD retenčních časů ≤0,04 % (Alliance do 0,15 %), RSD ploch ≤0,5 % (Alliance 0,6–2,8 %). Systémová opakovatelnost a stabilita chromatogramů u Vanquish Core usnadňuje rutinní kontrolu kvality.

Přínosy a praktické využití metody

• Úspěšný přenos metody bez změny parametrů monografie EP
• Zvýšení produktivity laboratoře díky vyšší spolehlivosti a rychlejší přípravě analýz
• Minimalizace náročné revalidace při nasazení nového přístroje
• Standardizace mezi odděleními a mezi laboratořemi s různými HPLC systémy

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření přenosu metod na další farmakopejní analýzy a automati zace nastavení metod podporuje rychlejší zavádění moderních HPLC systémů. Integrace s pokročilou softwarovou kontrolou, adaptivní gradientní řízení a využití menších kolón ke zkrácení doby analýzy představují příští kroky ve zlepšování efektivity a udržení kvality.

Závěr

Metoda stanovení nečistot chlorhexidinu byla úspěšně přenesena z Waters Alliance na Thermo Scientific Vanquish Core bez nutnosti jakýchkoliv změn parametrů. Vanquish Core poskytl ekvivalentní výsledky s výrazně lepší opakovatelností a rozlišením, což potvrzuje robustnost přenosu a výhody moderní technologie pro rutinní QC analýzy.

Reference

• Swartz M.E.; Krull I. Analytical Method Transfer; LCGC North America 2006.
• Paul C.; Grübner M. et al. Thermo Scientific White Paper 72711, 2018.
• European Pharmacopoeia (Ph. Eur.) 10.0, monograph 0658 Chlorhexidine digluconate solution.
• World Health Organization Model List of Essential Medicines, 21st ed. 2019.
• United States Pharmacopeia USP42-NF37, Chlorhexidine gluconate solution, 2019.