Straightforward transfer of an EP method for impurity analysis of chlorhexidine from an Agilent 1260 Infinity LC system to a Vanquish Core HPLC system

Význam tématu

Chlorhexidin je klíčové antiseptikum využívané v lékařské a hygienické praxi. Jeho analýza a monitorování nečistot jsou nepostradatelné pro zajištění kvality a bezpečnosti konečného přípravku. Převod farmakopejních HPLC metod mezi různými přístroji umožňuje sdílení analytických postupů mezi laboratořemi, šetří čas na revalidaci a zaručuje konzistentní výsledky napříč zařízeními.

Cíle a přehled studie / článku

Tento článek demonstruje bezproblémový přenos oficiální metody Evropské farmakopeje pro stanovení nečistot chlorhexidin diglukonátu z Agilent 1260 Infinity LC systému na Thermo Scientific Vanquish Core HPLC systém. Důraz je kladen na porovnání chromatografického výkonu a využití možnosti jemného doladění systémového gradient delay volume (GDV) na novém zařízení.

Použitá metodika a instrumentace

Reagencie a materiály:

• Deionizovaná voda (≥18,2 MΩ·cm)
• Acetonitril LC/MS (Optima)
• Trifluoroctová kyselina LC/MS (Pierce)
• EP referenční standard chlorhexidinu s nečistotami

Chromatografické podmínky:

• Kolona: Thermo Scientific Hypersil GOLD C18, 4,6×250 mm, 5 µm, 175 Å
• Mobilní fáze A: 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (80/20 v/v), B: 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (10/90 v/v)
• Gradient: 0–2 min 0 % B, 2–32 min lineárně na 20 % B, 32–37 min 20 % B, 37–47 min na 30 % B, 47–54 min 30 % B, 54–55 min návrat na 0 % B, 55–62 min 0 % B
• Tok: 1 mL/min, teplota kolony 30 °C, detekce 254 nm
• Injekční objem: 10 µL

Instrumentace:

• Agilent 1260 Infinity Quaternary LC systém
• Thermo Scientific Vanquish Core Quaternary HPLC systém
• Autosamplery s možností nastavení idle volume (0–230 µL)
• Chromeleon 7.3 pro akvizici a zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Při porovnání sedmi opakovaných injekcí na obou systémech byly dosaženy téměř identické chromatogramy. Relativní retenční časy jednotlivých nečistot odpovídaly farmakopejním požadavkům a mezi instrumenty se lišily v řádu setin minuty. Vanquish Core vykázal mírně užší píky a nepatrně vyšší rozlišení. Rozdíly v absolutních retenčních časech (0,02–0,22 min) byly atribuovány rozdílné standardní hodnotě GDV. Zvýšení idle volume autosampleru z výchozích 25 µL na 200 µL významně zlepšilo sladění retenčních časů, což demonstruje flexibilitu nastavení GDV pro kompaktní doladění přenosu metody.

Přínosy a praktické využití metody

• Umožňuje rychlý a validovatelný přenos kompendiálních metod mezi různými HPLC systémy bez nutnosti rozsáhlé revalidace.
• Vysoká robustnost a shoda chromatografických parametrů zaručují reprodukovatelnost v různých laboratořích.
• Přizpůsobitelné GDV a idle volume minimalizují odchylky retenčních časů a usnadňují plnění stanovených kritérií syst. způsobilosti.

Budoucí trendy a možnosti využití

Vývoj dalších automatizovaných nástrojů pro optimalizaci systémových objemů gradientu, rozšíření metod na UHPLC a implementace umělé inteligence pro predikci doladění chromatografických podmínek. Propojení s cloudovými platformami zrychlí sdílení a validaci kompendiálních metod ve více lokalitách.

Závěr

Ukázalo se, že přenos EP metody pro analýzu nečistot chlorhexidinu z Agilent 1260 Infinity na Vanquish Core HPLC je přímý a úspěšný. Oba systémy poskytují zcela ekvivalentní chromatografické výsledky a díky možnosti nastavitelného GDV lze snadno dosáhnout optimálního sladění retenčních časů.

Reference

1. Swartz ME, Krull I. Analytical Method Transfer. LCGC North America. 2006;24(11):1204–1214.
2. Paul C, Grübner M, et al. An Instrument Parameter Guide for Successful (U)HPLC Method Transfer. Thermo Scientific White Paper 72711, 2018.
3. Grübner M. Transfer of an EP Method for Mebendazole from a Waters Acquity UPLC to Vanquish Horizon UHPLC. Thermo Scientific Application Note 72939, 2019.
4. Grübner M, Paul C, Steiner F. Method Transfer of a USP Acetaminophen Assay from Agilent 1260 Infinity to UltiMate 3000 SD and Vanquish Flex. Thermo Scientific Application Note 72717, 2018.
5. European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare. European Pharmacopoeia 10.0, Monograph 0658: Chlorhexidine digluconate solution, 2018.
6. World Health Organization. WHO Model List of Essential Medicines, 21st edition, 2019.
7. United States Pharmacopeial Convention. USP42–NF37, Chlorhexidine gluconate solution monograph, 2019.
8. European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare. Ph. Eur. Reference Standard: Chlorhexidine for system suitability CRS batch 2, leaflet.
9. Franz H, Wachinger T, Schmidt C. DE102015112900B4: Method of transferring a method in liquid chromatography, 2015.
10. Thermo Fisher Scientific. Find out more at thermofisher.com/vanquishcore, AN73309-EN 0120S.