Analysis of Tea Beverages Using Catechin Analysis Kit

Význam tématu

Analýza katechinů v čajových nápojích je klíčová pro hodnocení jejich zdravotních benefitů, kvality a autenticity. Katechiny představují významné biologicky aktivní látky s antioxidačním účinkem a jejich přesné stanovení přispívá k výzkumu výživy, kontrole kvality a označování potravin.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit kompletní testovací sadu pro kvantifikaci 11 katechinů (včetně methylovaných forem) a kofeinu v čajových listech a nápojích. Spolupráce NARO a Shimadzu umožnila vytvořit validované postupy od přípravy vzorku až po HPLC detekci a demonstrovat jejich aplikaci na zelený, černý a oolong čaj.

Použitá metodika a instrumentace

Příprava vzorku:

• Extrahování vzorků s ascorbanovou kyselinou a EDTA jako ředidlem pro stabilizaci katechinů.
• Centrifugace (5 min při 2000×g) a následné zředění supernatantu 5krát ředidlem.
• Filtrace přes TORAST™ Disc (hydrofilní PTFE) před HPLC analýzou.

HPLC podmínky:

• Přístroj: Nexera™ XR
• Kolona: Shim-pack™ GISS C18 (150 × 4,6 mm, 3 µm)
• Mobilní fáze: A) 0,2 % kyselina fosforečná ve vodě, B) methanol; gradient 16 %→45 %→90 %→16 %
• Průtok: 0,85 mL/min, teplota kolony 55 °C, objem injekce 10 µL
• Detekce: PDA na 242 nm (GC, EGC) a 272 nm (ostatní)

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky pro všechny analyty vykázaly lineární závislost s r2 > 0,9999 v rozsahu 0,2–100 mg/L. Celkový čas separace 12 látek činil přibližně 24 min.
Obsahy v nápojích (mg/L):

• Zelený čaj: celkem 267,2 (katechiny), kofein 88,3
• Černý čaj: 69,1, kofein 98,6
• Oolong: 72,1, kofein 102,1

Ve černém a oolongu jsou nižší koncentrace katechinů kvůli fermentaci a tvorbě theaflavinů. Ne­epi-formy katechinů se objevily po sterilizaci vlivem izomerizace.
Opakovatelnost (n = 6) byla lepší než 1,6 % RSD a recovery spíše mezi 87,7 % a 107,2 %, což potvrzuje robustnost metody.

Přínosy a praktické využití metody

Sada umožňuje rychlý náběh analýzy bez hlubší zkušenosti s HPLC; přednastavené metody a kontrola UV spektra zrychlují vyhodnocení výsledků. Lze ji využít v laboratořích QA/QC, výzkumných centrech i potravinářském průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další rostlinné matrixy a biologické vzorky.
• Integrace s pokročilou metabolomikou pro komplexní profilování polyfenolů.
• Vývoj přenosných zařízení pro on-site kontrolu kvality čajů.

Závěr

Představená catechin analysis kit poskytuje validovaný, reprodukovatelný postup pro kvantitativní stanovení katechinů a kofeinu v různých typech čajových nápojů, čímž usnadňuje výzkum i rutinní kontrolu kvality.

Reference

• 1) Mitsuaki Sano, Function of tea catechins and structural changes during cooking, Journal of the Japanese Society of Cooking, Vol. 40, No. 4, 223–230 (2007)