Seamless transfer of elution gradients from Agilent 1100/1200 Series LCs to an Agilent 1290 Infinity LC using ISET

Význam tématu

Instrument-to-instrument přenos analytických metod představuje zásadní výzvu zejména v regulovaných prostředích. Díky rozdílům v objemu mrtvého prostoru a chování míchání gradientu mohou výsledné retenční časy a rozlišení vzorků významně kolísat.

Cíle a přehled studie

Studie se zabývá využitím technologie Agilent Intelligent System Emulation Technology (ISET) v systému 1290 Infinity LC pro bezproblémový přenos gradientních metod z konvenčních LC Agilent 1100 Series bez potřeby úprav původních postupů.

Použitá instrumentace

• Agilent 1100 Series Quaternary LC: pumpa G1311A, autosampler G1313A, kolonní komora G1316A, detektor G1315B.
• Agilent 1290 Infinity LC s ISET: pumpa G4220A, autosampler G4226A, termočlánek G1330B, kolonní komora G1316C, detektor G4212A.
• Software: Agilent ChemStation revize C.01.03, ISET revize 1.0.

Použitá metodika

Pro experimenty byl použit uracil jako tracer (10 mg/L) v methanolu a vodě. Kapilární kolona byla udržována na 30 °C, detekce probíhala DAD při 254/4 nm s referencí 360/100 nm a frekvencí 10 Hz. Testováno bylo šest různých gradientních profilů, zahrnujících lineární změny složení, stupňovité přechody i isokratické úseky, přenášené mezi systémy bez modifikace metod.

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny přenesené gradientní profily vykázaly shodu nad 99,9 % oproti originálním křivkám z Agilent 1100 Series LC. ISET prokázala schopnost věrně emulovat i náhlé změny složení a isokratické segmenty bez zpoždění či deformace průběhu.

Přínosy a praktické využití metody

• Okamžitý přenos existujících metod mezi přístroji bez nutnosti nové kalibrace.
• Zachování retenčních časů a rozlišení v regulovaných laboratořích.
• Minimalizace chyb při ručním přepisování metod.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření emulace ISET na další generace chromatografických systémů, integrace do automatizovaných workflow a rozvoj nástrojů pro centralizovanou správu a validaci metod v laboratořích QA/QC.

Závěr

Agilent 1290 Infinity LC s ISET umožňuje spolehlivý a vysokopřesný přenos gradientních metod mezi konvenčními a UHPLC systémy bez jakýchkoli úprav původních protokolů, přičemž zachovává konzistentní retenční časy a chromatografické parametry.

Reference

• Agilent 1290 Infinity LC with Intelligent System Emulation Technology, Agilent publication 5990-8670EN, 2011.