The Separation of Seven Synthetic/Artificial Food Colors on Agilent HC(2)/TC(2) Reversed Phase Columns

Význam tématu

Cíle a přehled studie

Použitá metodika a instrumentace

• Instrumentace: Agilent 1200SL HPLC s DAD detektorem (254 nm).
• Kolona: Agilent TC-C18(2), 4,6 mm × 150 mm, 5 µm, vysokopurity silika B-type, plocha 290 m2/g, uhlíková nálož 12 %.
• Mobilní fáze: A) 20 mM fosfátový pufr pH 7,0; B) methanol.
• Gradient: 0–15 min lineárně z 10 % B na 90 % B.
• Průtok: 1 mL/min; teplota: 30 °C; objem injekce: 5 µL (pro nízké koncentrace až 50 µL).
• Testy provedeny při pH 2,2, 4,5 a 7,0 pro optimalizaci tvaru a rozlišení špiček.
• Lot-to-lot reproducibilita: tři šarže kolony za stejných podmínek.

Hlavní výsledky a diskuse

• pH mobilní fáze významně ovlivnilo tvar špiček a rozlišení nejkyslejších barviv (1–3), nejlepší výsledky byly při pH 7,0.
• TC-C18(2) poskytuje vyšší retenci a lepší separaci polárních barviv ve srovnání s HC-C18(2) (17 % uhlíku), u kterého se mění selektivita a pořadí elučních špiček.
• Lot-to-lot testy prokázaly minimální posuny retence a konstantní tvar špiček, což potvrzuje kvalitu výroby.
• V reálných vzorcích (oranžová sóda a prášková nápojová směs) byly identifikovány a odděleny tři až čtyři barviva s dostatečným rozlišením pro kvantifikaci.
• Při objemu injekce 50 µL byla zachována oddělovací kapacita a symetrie špiček, což umožňuje stanovení nízkých koncentrací.

Přínosy a praktické využití metody

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro potvrdivou identifikaci a nižší limity detekce.
• Další vývoj kolonních stacionárních fází pro širší rozsah polárních i nepolárních látek.
• Miniaturizace metod a použití ekologičtějších organických modifierů.
• Automatizace přípravy vzorků a online monitoring výrobních procesů.

Závěr

Reference

1. Fang Yanyan, Agilent Technologies, publikace 5989-3639CHCN.
2. Rongjie Fu et al., Agilent Technologies Application Note 5989-8307EN, 2008.