A High-Throughput Method for the Analysis of 19 Beta Blockers Using a UHPLC Column and System Combination

Význam tématu

Beta-blokátory jsou klíčovými farmakologickými látkami používanými při léčbě kardiovaskulárních onemocnění. Efektivní a vysokopropustná analytická metoda umožňuje rychlý screening a kontrolu kvality, což zvyšuje produktivitu laboratoří a snižuje náklady.

Cíle a přehled studie / článku

Studie demonstruje využití kolony Hypersil GOLD VANQUISH (1,9 µm, 100 × 2,1 mm) a UHPLC systému Vanquish pro separaci 19 beta-blokátorů během 2 až 4 minut. Klíčovým cílem je maximalizovat průchodnost a zachovat dostatečnou rozlišitelnost analytů pro screeningové účely.

Použitá metodika a instrumentace

• Kolona: Hypersil GOLD VANQUISH 1,9 µm, 100 × 2,1 mm.
• Mobilní fáze A: 20 mM amonný formiát, pH 3,0; mobilní fáze B: acetonitril s 0,1 % kyseliny mravenčí.
• Gradient a průtok: Standardně 0,8 mL/min s 4minutovým oknem; optimalizace na 1,7 mL/min s 2minutovým oknem.
• Teplota kolony: 40 °C, detekce UV při 270 nm, sběr dat 100 Hz.
• Systém: Vanquish UHPLC (pumps, sampler, column compartment, pre-heater, DAD HL), LightPipe 10 mm průtoková kyveta.
• Software: Chromeleon 7.2 SR2 pro řízení a zpracování dat.
• Příprava vzorku: Primární roztoky 1 mg/mL v metanolu nebo vodě, pracovní koncentrace 25 µg/mL.

Hlavní výsledky a diskuse

Plná baseline separace všech 19 beta-blokátorů byla dosažena při 0,8 mL/min během 4minutového okna (max. tlak 710 bar). Zvýšení průtoku na 1,7 mL/min (tlak až 1365 bar) zkrátilo detekční okno na 2 minuty, přičemž klíčové dvojice analytů zůstaly dostatečně rozlišeny pro screening. Výpočty rozlišení (Rs) a chromatogramy ukazují minimalizaci šířky píku a zachování analytického výkonu i při vysoké rychlosti.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda přináší:

• Výrazné zrychlení analýzy beta-blokátorů (2,8 min. celkový cyklus).
• Vysokou propustnost a nižší náklady na vzorek.
• Opakovatelnost a symetrické píky díky vysoce čisté silice a optimalizovanému systému.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směry rozvoje:

• Využití maximálního provozního tlaku (>1500 bar) pro další zrychlení.
• Rozšíření aplikace na jiné skupiny látek a komplexní matice.
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro potvrzovací analýzu.
• Automatizace přípravy vzorků a vylepšené softwarové nástroje pro rychlou kalibraci.

Závěr

Kombinace kolony Hypersil GOLD VANQUISH a systému Vanquish UHPLC umožňuje rychlý a spolehlivý screening 19 beta-blokátorů v čase pod 3 minuty s dostatečným rozlišením pro rutinní použití ve výzkumu i QA/QC laboratořích.

Reference

• Jones J.; A High-Throughput Method for the Analysis of 19 Beta Blockers Using a UHPLC Column and System Combination; Thermo Fisher Scientific Application Note 21498, 2016.