Determination of Benzenesulfonic Acid Counterion in Amlodipine Besylate by Ion Chromatography

Význam tématu

V analytické chemii farmaceutických látek je stanovení protináplně (counteriontu) nezbytné pro ověření stechiometrie soli, správného molárního hmotnostního vzorce a úplnosti solotvorby. Kontrola množství benzensulfonátu v amlodipinu besylátu navíc přispívá k zajištění účinnosti, stability a kvality finálního léčiva.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout jednoduchou, rychlou a přesnou metodu iontové chromatografie (IC) pro kvantifikaci benzensulfonátu v API amlodipinu besylátu. Studie předpokládala využití elektrolyticky generovaného hydroxidového eluenta, kapacitně potlačené vodivostní detekce a komerčně dostupných kolonek pro aniontovou separaci.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byl použit systém Dionex ICS-5000 HPIC s modulárním pumpovacím a eluentním generátorem, potlačovačem ASRS 300 a chromatografickým softwarem Chromeleon. Jako kolonková sada sloužil Dionex IonPac AG18 (guard) a AS18 analytický sloupec (2 mm ´ 250 mm). Eluent byl generován elektrolyticky jako 60 mM KOH, průtok 0,25 mL/min, objem injekce 5 µL. Detekce potlačenou vodivostí zajistila citlivost na úrovni nS. Pro zvýšení vzorkové propustnosti byla u vybraných analýz použita kratší verze kolony s částicemi 4 µm při průtoku 0,38 mL/min.

Hlavní výsledky a diskuse

• Specifičnost: Blank chromatogram (DI voda) neprokázal rušivé píky v retenční době benzensulfonátu (~12 min).
• Linearita: Kalibrace v rozmezí 0,5–20 µg/mL vykázala r² = 0,9995 (kvadratický fit).
• Citlivost: LOD odhadnut na 0,02 µg/mL (S/N = 3), LOQ 0,07 µg/mL (S/N = 10).
• Precision: Intradenní RSD retenční doby <0,05 % a plochy <0,9 %; mezidení RSD <0,03 % a <0,7 %.
• Přesnost: Naměřené obsahy benzensulfonátu 28,1–28,4 % v souladu s teoretickými 27,9 %. Recoverie při spikech 50, 100 a 150 % v rozsahu 98,7–104,4 %.
• Zrychlená analýza: Kratší kolona 4 µm zkrátila dobu analýzy benzensulfonátu na ~5 min, čímž se téměř zdvojnásobil počet vzorků za hodinu.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou automatizaci díky eluentnímu generátoru, vynikající reprodukovatelnost a citlivost potřebnou pro rutinní kontrolu kvality API. Je vhodná pro potvrzení kompletace solotvorby a sledování protináplně při výzkumu a vývoji i při výrobě léčiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší nasazení sloupců s menšími částicemi pro vyšší efektivitu a rychlost, integrace IC s hmotnostní spektrometrií pro identifikaci organických protináplní nebo degradantů a rozšíření aplikací na další farmaceutické soli a biologické matice.

Závěr

Vyvinutá IC metoda s elektrolyticky generovaným KOH elu entem a potlačenou vodivostní detekcí prokázala spolehlivost, přesnost a robustnost při stanovení benzensulfonátu v amlodipinu besylátu. Možnost použití rychlé kolony 4 µm navíc zkracuje dobu analýzy a zvyšuje propustnost laboratoře.

Reference

1. Elder D.P. et al. Utility of Sulfonate Salts in Drug Development. J. Pharm. Sci. 2010.
2. Kumar D.B. et al. RP-HPLC Method for Amlodipine and Benazepril. Int. J. Chem. Pharm. Sci. 2011.
3. United States Pharmacopeia 34–National Formulary 29, 2011.
4. De Borba B.M., Rohrer J.S. Ion Chromatography of Drug Counter-Ions. 2012.
5. ICH Guideline Q2(R1) Validation of Analytical Procedures.