Determination of Carbachol In Ophthalmic Solutions Using a Reagent-Free Ion Chromatography System

Význam tématu

Carbachol se používá pro léčbu glaukomu a jako midriatikum v oftalmologii. Přesná kvantifikace jeho koncentrace v očních roztocích je nezbytná pro zajištění terapeutické účinnosti a prevenci komplikací. Metoda bez přídavných činidel eliminuje nutnost přípravy elučního roztoku, zvyšuje reprodukovatelnost a snižuje riziko operačních chyb.

Cíle a přehled studie

Cílem je vyvinout a validovat postup iontové chromatografie pro stanovení karbacholu, cholinu, bethanecholu a rozpadového produktu 2 HPTA v modelových očních roztocích. Studie hodnotí linearitu, limity detekce, specifitu vůči běžným kationtům a opakovatelnost metody.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda využívá reagent free IC s eluentem metansulfonové kyseliny generovaným elektrolyticky. Analytická kolona IonPac CS17 s guard kolonou CG17 je kombinována s potlačenou vodivostní detekcí pomocí CSRS ULTRA II. Software Chromeleon řídí systém ICS 2000 s autosamplerem CR CTC II.

• Eluent Generator s EluGen II MSA cartridgem
• Potlačující jednotka CSRS ULTRA II
• Kolony IonPac CG17 a CS17
• Autosampler CR CTC II
• Software Chromeleon 6.8 SP2

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje baseline separace karbacholu od běžných kationtů a analogu bethanecholu. Linearita dosahuje rozsahu 0,02 az 1000 mg l pro karbachol a 0,02 az 500 mg l pro cholin a 2 HPTA s korelačním koeficientem vyšším než 0,9999. Limity detekce jsou v řádu jednotek µg l, opakovatelnost < 1 RSD. Obnova spikovaných vzorků dosahuje 96 az 98 procent. Metoda spolehlivě sleduje konverzi karbacholu na cholin a bethanecholu na 2 HPTA.

Přínosy a praktické využití metody

Postup umožňuje rychlou a přesnou kontrolu kvality očních roztoků bez ruční přípravy elučních roztoků. Vyšší automatizace snižuje operační nároky a zkracuje dobu analýzy na 25 minut, což je vhodné pro rutinní QC laboratoře a farmaceutické výrobní procesy.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na další kvartérní amoniové sloučeniny a příbuzná léčiva
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro vyšší selektivitu
• Vývoj miniaturizovaných a přenosných systémů pro in situ měření
• Implementace v kontinuálních výrobních linkách pro on line monitoring

Závěr

Prokázaná RFIC metoda je robustní a efektivní pro stanovení karbacholu, cholinu, bethanecholu a 2 HPTA v očních roztocích. Nabízí vysokou přesnost, reprodukovatelnost a zjednodušenou obsluhu bez manuální přípravy elučního činidla.

Reference

1. Determination of Carbachol in Aqueous Solutions J Pharm Sci 1969 58 602 604
2. US Pharmacopeia 29 NF 24 2006
3. Application Note Choline and Acetylcholine Dionex Corporation LPN 034516
4. Application Note Determination of Choline in Dry Milk and Infant Formula Dionex Corporation LPN 1054
5. Application Note Determination of Bethanechol by Ion Chromatography Dionex Corporation LPN 1510