Rapid Analysis of 37 FAMEs with the Agilent 8860 Gas Chromatograph

Význam tématu

Analýza mastných kyselin ve formě methylesterů (FAMEs) je klíčová v potravinářské chemii, zejména pro hodnocení nutričního profilu a kvality potravinářských tuků. Rapidní a spolehlivé stanovení 37 FAMEs zjednodušuje kontrolu jakýchkoli vzorků, včetně kojeneckých diet a potravin s vysokým obsahem polynenasycených mastných kyselin (omega-3, omega-6). Moderní chromatografické technologie umožňují zkrátit dobu analýzy a zvýšit propustnost laboratoře bez kompromisů na rozlišení klíčových izomerů a stopových komponent jako ARA, EPA a DHA.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této aplikace bylo demonstrovat rychlou, reprodukovatelnou a vysoce účinnou metodu pro separaci a kvantifikaci 37 FAMEs na platformě Agilent 8860 GC-FID. Studie porovnala dva rozměry DB-FastFAME kolony (30 m × 0,25 mm × 0,25 µm a 20 m × 0,18 mm × 0,2 µm), vyhodnotila opakovatelnost, rozsah lineárnosti kalibrace ARA, EPA a DHA a aplikovala metodu na vzorky kojeneckých formula.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky kojeneckého proteolytického formula (částečně a hluboce hydrolyzovaná, aminokyselinová) byly připraveny dle normy GB 5009.168-2016 (hydrolýza a esterifikace mastných kyselin). Calibration standards ARA, EPA, DHA byly v rozmezí 5–1000 µg/mL.

• Instrumentace: Agilent 8860 GC s FID detektorem
• Autosampler: Agilent 7693A, injekční objem 1 µL, split/splitless (250 °C, poměr 100:1)
• Kolony: DB-FastFAME 30 m × 0,25 mm × 0,25 µm (p/n G3903-63011) a 20 m × 0,18 mm × 0,2 µm (p/n G3903-63010)
• Mobilní fáze: dusík, konstantní tlak (12 psi pro 30 m, 20 psi pro 20 m)
• Program teploty: 80 °C (0,5 min), +40 °C/min do 165 °C, +4 °C/min do 230 °C (4 min) pro 30 m; 80 °C, +35 °C/min do 194 °C, +5 °C/min do 245 °C pro 20 m
• Detekce: FID (260 °C; H2 40 mL/min, vzduch 400 mL/min, make-up N2 25 mL/min)

Hlavní výsledky a diskuse

Obě kolony dosáhly plného vyřešení 37 FAMEs:

• 30 m kolona: runtime pod 24 min, vynikající rozlišení cis/trans izomerů a ARA/EPA/DHA (Rs ≥1,84–2,27)
• 20 m kolona: runtime pod 14 min, obdobné rozlišení klíčových složek (Rs ≥1,38–2,12)

Opakovatelnost (n=6) vykázala RSD plochy <1 % pro všechny sloučeniny kromě C4:0. Kalibrační křivky ARA, EPA a DHA dosáhly koeficientu determinace ≥0,9997.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou propustnost a reprodukovatelnost vhodnou pro rutinní kontrolu potravinářských tuků, olejů a kojeneckých formule. Kratší doba analýzy a robustní kolony snižují provozní náklady a zvyšují efektivitu laboratoří QA/QC.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další zrychlení analýzy slibují inovativní technologie přímého ohřevu kolony (např. Intuvo) a využití hélia či alternativních dopravních plynů. Integrace automatizovaných úprav vzorku a online datové analýzy podpoří vyšší úroveň kvality a sledovatelnosti výsledků v potravinářském a klinickém výzkumu.

Závěr

Agilent 8860 GC-FID s DB-FastFAME kolony představuje spolehlivou a rychlou platformu pro komplexní analýzu 37 FAMEs s vysokou opakovatelností, lineárností a rozlišením. Volba mezi 30 m a 20 m kolonu umožňuje optimalizaci mezi kapacitou, životností a rychlostí analýzy podle konkrétních potřeb laboratoře.

Reference

1. Zhou Y.; Wu H. Improving the analysis of 37 fatty acid methyl esters. Agilent Technologies Application Note, 5991-8706EN, 2018.
2. Zhou Y. Rapid separation of fatty acid methyl esters. Agilent Technologies Application Note, 5994-0116EN, 2018.