Sample Prep for Trace Analysis of Adulterants in Erectile Dysfunction Dietary Supplements

Význam tématu

Rychle rostoucí trh s doplňky stravy přináší zvýšené riziko falšování zejména přípravků proti poruchám erekce, kdy výrobci často nasazují farmaceutické inhibitory PDE-5 (sildenafil, tadalafil, vardenafil) ke zvýšení účinku. Regulace a kontrola kvality těchto produktů je klíčová pro ochranu spotřebitele před zdravotními riziky a nelegálními příměsemi.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo porovnat dvě strategie předúpravy vzorků (modifikovaný QuEChERS a juničkovou SPE metodiku s Agilent Bond Elut Plexa PCX/Captiva) pro stopovou analýzu inhibitorů PDE-5 a dalších aditiv v doplňcích proti erektilní dysfunkci pomocí LC/MS/MS.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorky: celé tablety a kapsle homogenizované v mixeru, odebraný materiál 1 g.
• Chemikálie: LC/MS-grade metanol, acetonitril, voda, analytické kyseliny (formová, fosforečná, octová) a hydroxid amonný.
• Standardy: čisté soli analyzovaných látek (VWR, Sigma-Aldrich).
• Předúprava QuEChERS: extrakce 10 mL 80 % metanolu, dSPE čištění s GCB, C18 a MgSO4.
• Předúprava SPE: cartridge Bond Elut Plexa PCX (kationtová výměna) a Captiva ND; kyselá úprava vzorku, nabindování, praní, eluční kroky s NH4OH v ACN/MeOH, následná rekonsolidace do 70:30 H2O:MeOH.
• Chromatografie: Agilent 1290 Infinity LC, kolona Poroshell 120 EC-C18 (2.1×100 mm, 2.7 µm), gradient 10–80 % B při 0.4 mL/min, injekce 10 µL.
• Hmotová spektrometrie: Agilent 6410 Triple Quadrupole, MRM režim, optimalizované přechody a energie kolize pro yohimbin, sildenafil, vardenafil, tadalafil, icariin a deuterovaný IS sildenafil-d8.

Hlavní výsledky a diskuse

QuEChERS ukázal velmi dobré recovery (80–110 %) a reprodukovatelnost (%RSD <15 %) v jednoduchém matrice panax ginsengu, ale selhal u vícekombinačních přípravků obsahujících botanické extrakty. SPE s Plexa PCX poskytlo konzistentní recoverie (~80–90 %) při %RSD <7 %, pouze icariin vykazoval nižší výtěžnost při velmi komplexních vzorcích. Chromatogramy ukázaly výrazně čistší základní linii po SPE čištění než bez čištění nebo po QuEChERS.

Přínosy a praktické využití metody

Vysoce selektivní SPE přináší výrazné snížení rušivých látek v náročných botanických matricích, čímž umožňuje spolehlivou kvantifikaci pesticidních inhibitorů PDE-5 i při stopových koncentracích. Metodika je vhodná pro kontrolní laboratoře, regulační orgány i farmaceutický a potravinářský průmysl.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření analýzy o nově vznikající deriváty PDE-5, integrace automatizovaných systémů SPE, využití vysokorozlišovací MS pro neznámé kontaminanty, miniaturizace postupů a přechod k ekologičtějším rozpouštědlům.

Závěr

Při analýze složitých doplňků stravy proti erektilní dysfunkci je selektivní SPE s Bond Elut Plexa PCX vhodnější volbou než modifikovaný QuEChERS, zejména pro stopovou detekci farmaceutických příměsí. Navržené postupy lze adaptovat na širší spektrum analytů a matrice.

Reference

1. Blumenthal M, Lindstrom A, Ooyen C, Lynch ME. HerbalGram. 2013;99:60.
2. Nicoletti M. International Journal of Food Sciences and Nutrition. 2012;63(2).
3. Cohen PA, Travis JC, Venhuls BJ. Drug Testing and Analysis. 2013.
4. Song F, El-Demerdash A, Lee S-JSS. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2012;70:40.