Separation of enantiomers and conformers of Tofisopamon

Význam tématu

Udržení stereochemické čistoty a oddělení enantiomerů i konformerů Tofisopamu je klíčové pro vývoj léčiv, zajištění účinnosti a bezpečnosti farmaceutických přípravků.

Cíle a přehled studie / článku

Studie popisuje systematický screening immobilizovaných polysacharidových chiralních kolon (CHIRALPAK IA–ID) a různých mobilních fází při SFC s cílem rychle a efektivně separovat všechny čtyři formy Tofisopamu (R(+)/S(–) enantiomery a jejich conformery Ax./Eq.) za použití Agilent 1260 Infinity Analytical SFC.

Použitá metodika a instrumentace

• Superkritická fluidní chromatografie s CO2 (průtok 3,0 mL/min, tlak 150 bar, teplota 35 °C) s modifikátory MeOH, 2-PrOH, ACN doplněnými diethylaminem (0,1 % v/v).
• Chirální kolony CHIRALPAK IA, IB, IC, ID (4,6 × 150 mm, 5 µm, immobilizované amyloza- a celulózodériváty).
• Agilent 1260 Infinity Analytical SFC System: SFC Fusion A5 modul pro CO2 conditioning, 1260 Infinity Binary Pump, autosampler, DAD detektor s vysokotlakou flow cell.

Hlavní výsledky a diskuse

• Immobilizované polysacharidové CSP ukázaly vynikající enantioselektivitu a širokou kompatibilitu s organickými modifikátory.
• MeOH prokázal nejrychlejší kinetiky a nejlepší rozlišení (podíl Ax. konformerů až 26 %) na kolónách IA a ID s celkovou délkou analýzy 3–5 minut.
• Pořadí eluce Ax. a Eq. tvarů závisí na povaze modifikátoru – přechod MeOH→2-PrOH nebo ACN mění relativní chromatografické chování.
• Systém vykázal vysokou reprodukovatelnost (120 injekcí, stabilní retenční časy i rozlišení) díky přesnému řízení tlaku CO2 a mobilní fáze.

Přínosy a praktické využití metody

• Zrychlení a zefektivnění chiralních separací v oblasti výzkumu a QA/QC farmaceutik.
• Možnost rychlého stanovení enantiomerní přebytačnosti (ee) a kvantifikace čtyř tvarů ve vzorku.
• Flexibilita použití stejných kolon pro SFC i HPLC rozšiřuje analytické možnosti bez nutnosti výměny stacionárních fází.
• Nižší spotřeba organických rozpouštědel a vyšší propustnost analýz vedou ke snížení nákladů a ekologické zátěže.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další automatizace vysokopropustných chiralních screeningů a integrace robotických systémů.
• Vývoj in silico nástrojů pro předpověď afinity CSP k novým chirálním modulům.
• Rozšíření metodiky SFC pro separaci chirálních metabolit a nových léčivých kandidátů.
• Optimalizace ekologičtějších a udržitelných mobilních fází pro průmyslovou chromatografii.

Závěr

SFC na immobilizovaných polysacharidových stacionárních fázích poskytuje rychlou, robustní a vysoce reprodukovatelnou separaci enantiomerů a konformerů Tofisopamu. Metoda nabízí významný přínos pro farmaceutický vývoj i kontrolu kvality chirálních látek.

Reference

1. T. Seppala et al., Psychopharmacology 69 (1980) 209–218.
2. A. Bond, M. Lader, Eur. J. Clin. Pharmacol. 22 (1982) 137–142.
3. M. Hu et al., J. Chromatogr. A 1129 (2006) 47–53.
4. T. Zhang et al., J. Chromatogr. A 1191 (2008) 214–222.
5. P. Franco, T. Zhang, J. Chromatogr. B 875 (2008) 48–56.
6. T. Zhang, P. Franco, Chiral Separation Techniques, VCH (2009) 99–134.
7. T. Zhang et al., Posters at Chirality ISCD 23 & SFC 2011.