Acclaim columns overview

Význam tématu

Chromatografie kapalinou je nezbytná pro spolehlivou analýzu širokého spektra látek v oblasti farmacie, životního prostředí, potravin, biotechnologií a průmyslu.
Vývoj stacionárních fází s různými povrchovými chemiemi, jako jsou invertované fáze C18, C8, C30, fenyl, polar-embedded, HILIC, Mixed-Mode a speciální fáze pro organické kyseliny či povrchově aktivní látky, umožňuje řešit náročné separace, dosahovat vyšší účinnosti a selektivity.

Cíle a přehled studie / článku

Prezentovat přehled rodiny Thermo Scientific™ Acclaim™ HPLC a UHPLC kolon a jejich modifikací pro náročné aplikace.
Ukázat principy volby vhodné kolony z hlediska chemie fáze, velikosti částic, rozměrů a podmínek mobilní fáze.
Ilustrovat aplikace v separaci malých molekul, peptidů, proteinů, iontů, organických kyselin, povrchově aktivních látek, explozivních zbytků, vitamínů a polymerů.

Použitá metodika a instrumentace

Všechny ukázky byly získány pomocí HPLC a UHPLC systémů Thermo Scientific™ (Vanquish™ UHPLC, UltiMate™ 3000 RS, Rapid Separation LC).
Sorbéry: křemenné částice o průměru 2,2, 3 nebo 5 µm, pórovitost 120–300 Å, povrchové funkční skupiny:

• Invertované fáze: C18, C8, C30, Phenyl-1, Polar Advantage, Polar Advantage II.
• HILIC: Acclaim HILIC-10 a Mixed-Mode HILIC-1.
• Mixed-Mode: WAX-1 (aniontově), WCX-1 (kationtově), Trinity P1 (rp/silná anion­táž/aniontový režim), Trinity P2 (HILIC/anion­táž/kation­táž).
• Speciální fáze: Organic Acid, Surfactant, Surfactant Plus, Explosives E2, Trinity Q1, Carbonyl C18, Carbamate, AmG C18.
• SEC: Acclaim SEC-300 (MW 100–50 kDa), SEC-1000 (MW 1 000–1 000 kDa).
• Detekce: UV/Vis, diodová array, Charged Aerosol Detector (CAD), ELSD, refraktometrie (RI), elektrochemie.

Hlavní výsledky a diskuse

Invertované C18 a C8 fáze zajišťují vynikající retenci a symetrii špiček pro malomolekulární a hydrofobní analyty.
Polar-embedded fáze Polar Advantage a PA2 umožňují separace polárních a nepolárních látek s 100% vodními a organickými eluenty bez fenoménu dewetting.
Tri-modalní Trinity kolony kombinují rp, iontovou výměnu a HILIC, což umožňuje analýzu API a jejich protianiontů či kationtů v jednom běhu.
Application-specific fáze dosahují baseline separace organických kyselin, povrchově aktivních látek, explozivních sloučenin podle EPA 8330, DNPH derivátů karbonylů a karbamátek podle metod EPA.
SEC fáze nabízí vysoké rozlišení vodou rozpustných polymerů a mírné pórovité matrice eliminují sekundární interakce.

Přínosy a praktické využití metody

Komplexní rodina Acclaim kolon pokrývá aplikace v QA/QC farmaceutických látek, monitorování environmentálních kontaminant, potravinářského a nápojového průmyslu, biotechnologií a průmyslové analytiky.
Možnost optimalizace parametrů (pH, iontová síla, organická složka) poskytuje flexibilitu v metodickém vývoji.
Kombinace vysoké účinnosti a kompatibility s LC-MS/CAD umožňuje citlivé stanovení stopových množství.
Unikátní Mixed-Mode a speciální fáze zkracují časy analýz a zjednodušují přípravu vzorků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj nanopolymerních hybridních technologií pro multi-funkční stacionární fáze.
Rozšíření UHPLC formátů pro ultra-rychlé separace s minimální spotřebou rozpouštědel.
Integrace nových detekčních principů (HRAM MS, ion mobility, online derivatizace) pro vyšší selektivitu.
Automatizace a strojové učení v návrhu metod chromatografie.
Ekologické eluenty a zelená chromatografie minimalizující environmentální dopady.

Závěr

Thermo Scientific Acclaim kolony představují široce uplatnitelnou platformu pro náročné analytické úlohy.
Díky hluboké nabídce stacionárních fází, velikostí částic, formátů a aplikací usnadňují vývoj robustních, citlivých a selektivních metod.
Patentované povrchové úpravy a kombinace retenčních mechanismů zajišťují dosažení separačních výkonů, které jinde nejsou dostupné.

Reference

• McCracken RJ, Kennedy DG. J Chromatogr A. 1997;771:349–354.
• Rodriguez-Amaya DB, Kimura M. HarvestPlus Handbook for Carotenoid Analysis. Int Food Policy Res Inst. 2004.
• McWhinney BC, Ward G, Hickman PE. Clin Chem. 1996;42:979–981.