Master Your Polar Molecules, Especially Under Water

Význam tématu

Polar analyty se často špatně retencuji na klasických C18 sloupcích při vysokém obsahu vody. Nanopóry Poroshell 120 Aq-C18 umožňují použití 100% vodného mobilního fáze bez propadu výkonu. Tato technika je klíčová pro spolehlivou analýzu vodou rozpustných vitaminů, organických kyselin a dalších vysoce polárních sloučenin v potravinářství, farmacii či environmentální analytice.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo představit novou řadu sloupců InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18, které kombinují výhody nízkého backpressuru a vysoké rychlosti s možností stabilní retence polárních i nepolárních látek v plně vodném prostředí. Zhodnocena byla kompatibilita se všemi analytickými HPLC a UHPLC systémy a mezi dávková reprodukovatelnost.

Použitá metodika a instrumentace

Metody byly testovány na zařízení Agilent 1290 Infinity II s binárním čerpadlem a UV detekcí. Jako mobilní fáze sloužil 10 mM fosfátový pufr pH 2,5 a acetonitril v gradientním režimu pro separaci vitaminů a isokraticky pro organické kyseliny. Použity byly sloupce Poroshell 120 Aq-C18 2,7 µm, v rozměrech od 2,1 × 30 mm do 4,6 × 150 mm. Teplota činila 30 °C, průtok 1–1,5 ml/min a objem injekce 1–2 µl.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II Binary pump
• Poroshell 120 Aq-C18 sloupce, superficially porous, 2,7 µm
• UV detektor při 210 nm a 260 nm
• Laboratorní autosampler a termostat

Hlavní výsledky a diskuse

• Retence a rozlišení dvanácti vodou rozpustných vitaminů v gradientním režimu s počátečním 100 % vodným pufrem.
• Srovnání devíti organických kyselin s konkurencí ukázalo výrazně lepší retenci, ostřejší tvary píků a vyšší rozlišení.
• Výkon UHPLC při tlacích běžných HPLC přístrojů díky 50 % nižšímu backpressuru oproti sub-2 µm plně pórovitým částicím.
• Vysoká reprodukovatelnost mezi jednotlivými šaržemi sloupců.

Přínosy a praktické využití metody

• Možnost analýzy vysoce polárních i nepolárních látek ve stejném běhu.
• Stabilní provoz při 100 % vodné mobilní fázi bez dewettingu.
• Jednoduchý přenos metod mezi HPLC a UHPLC systémy.
• Široké uplatnění v QC laboratořích, bioanalytice a farmaceutickém výzkumu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Propojení této technologie s automatizovanými nástroji pro výběr kolony a optimalizaci gradientu, rozšíření o hmotnostní spektrometrii a aplikace v komplexních biologických matricích. Další vývoj by mohl zahrnovat modifikované nanopovrchy pro zvýšení selektivity a trvanlivosti fází.

Závěr

Poroshell 120 Aq-C18 představuje efektivní nástroj pro robustní separaci polárních i nepolárních sloučenin s vysokou reprodukovatelností a nízkým tlakem. Umožňuje rozšířit možnosti reversed-phase chromatografie v plně vodném prostředí.

Reference

• Agilent Technologies, Application Note 5994-5547EN, 2022