MS Imaging, LC/TOF, LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS
ZaměřeníLipidomika
VýrobceWaters
Význam tématu
V oblasti biomedicínského výzkumu jsou lipidomické analýzy klíčové pro profilování krevních sér. Tradiční LC/MS přístupy jsou časově náročné a náchylné k chybám způsobeným dlouhými pořadími analýz. DESI-HDMSE jako rychlá alternativní metoda umožňuje přímou analýzu malých objemů vzorku s minimální přípravou a výrazně zkracuje dobu měření.
Cíle a přehled studie / článku
- Ověřit použitelnost DESI-HDMSE pro vysokoprůchodovou lipidomickou analýzu lidského séra.
- Porovnat rychlost a kvalitu dat oproti konvenčním LC/MS metodám.
- Vypracovat workflow pro předběžné screeningové hodnocení 500 vzorků ze studie HUSERMET.
Použitá metodika a instrumentace
Vzorky séra (n=500) z HUSERMET studie byly extrahovány s isopropanolem a naneseny na teflonové body na skleněné podložce. Analýzu zajišťoval DESI-XS: kapilární napětí 0,6 kV, plyn 5 bar, mobilní fáze 98 % MeOH/2 % H₂O, průtok 2 µl/min a transfer line ohřátá na 300 °C.
Hmotnostní spektrum bylo získáno na SYNAPT G2-XS oa-QToF MS v režimu HDMSE s pozitivní i negativní ionizací. Data se zpracovávala pomocí MassLynx, DriftScope HDI, Progenesis QI a UNIFI.
Hlavní výsledky a diskuse
Výsledky ukázaly stabilní a silné signály v pozitivním i negativním módu (mid e5 a mid e4). Analýza nepotvrdila významné efekty sušení („coffee ring“) díky volatilitě isopropanolu. Multivariační analýza v Progenesis QI odhalila rozdíly v lipidových profilech a umožnila identifikaci potenciálních biomarkerů s přesností lepší než ±3 ppm.
Přínosy a praktické využití metody
- Rychlá analýza <15 s na vzorek a celkový čas <3 h pro 500 vzorků.
- Minimální příprava a zachování kompatibility se standardními LC/MS protokoly.
- Snížení rizika batch efektů a degradace vzorku.
- Možnost předběžného screeningu kontaminací a nesprávných vzorků.
Budoucí trendy a možnosti využití
- Integrace DESI-HDMSE do rutin QA/QC v klinických laboratořích.
- Rozšíření na jiné třídy biomolekul (metabolity, proteiny).
- Využití umělé inteligence pro automatickou identifikaci a kvantifikaci lipidů.
- Vývoj mobilních či miniaturizovaných DESI-MS systémů pro bodové aplikace.
Závěr
DESI-HDMSE představuje efektivní platformu pro vysokoprůchodové lipidomické screenování malých objemů séra. Metoda kombinuje rychlost, citlivost a přímou aplikaci s minimální přípravou vzorku a zachovává kompatibilitu s konvenčními LC/MS postupy.
Reference
- Nenalezena explicitní literatura v textu.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.