LC-MS/MS Method for the Determination of Paclitaxel in Human Serum

Význam tématu

Paclitaxel je protinádorové činidlo inhibující mitózu buněk, široce využívané v chemoterapii. Citlivá a přesná kvantifikace jeho koncentrace v lidském séru je zásadní pro farmakokinetické studie a monitorování léčby.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout rychlou a reprodukovatelnou metodu LC-MS/MS pro stanovení paclitaxelu v lidském séru. Metoda kombinuje výkonnou přípravu vzorku pomocí SOLA SPE a rychlou chromatografickou separaci na Accucore RP-MS kolonce.

Použitá metodika a instrumentace

Postup přípravy vzorku zahrnoval:

• Spike blank séra paclitaxelem a interním standardem docetaxelem
• Extrahce pomocí SOLA SPE (kondicionace, aplikace, mytí, eluace a následná rehydratace v acetonitrilu/vodě se sodnou solí)
• Sušení pod dusíkem a rekonstituce ve vodě/acetonitrilu se sodným octanem

Instrumentace:

• HPLC systém Dionex UltiMate 3000 RSLC
• Kolonka Accucore RP-MS 2,6 µm, 50 × 2,1 mm
• MS detektor Thermo Scientific TSQ Vantage s HESI ionizací v pozitivním režimu
• Software LC QUAN pro zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykázala lineární kalibraci v rozsahu 0,1–10 ng/mL s korelačním koeficientem r2 0,9982. Dolní mez kvantifikace (LLOQ) byla 0,1 ng/mL. Precize byla ≤ 6,6 % CV pro QC vzorky na třech úrovních. Extrakční výtěžnost paclitaxelu dosáhla 116 %. Chromatografická doba analýzy byla pouze 2 minuty s velmi ostrými a symetrickými píky.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý a robustní postup vhodný pro vysokopropustové laboratoře
• Vysoká citlivost a reprodukovatelnost měření
• Nízké nároky na objem rozpouštědel a jednoduchá příprava vzorku
• Využití v klinických farmakokinetických studiích a QA/QC

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na stanovení dalších taxanů a kombinovaných analýz
• Automatizace a miniaturizace přípravy vzorku
• Integrace s UHPLC a multidimenzionální chromatografií
• Standardizace mezi laboratořemi pro mezinárodní studie

Závěr

SOLA SPE v kombinaci s Accucore RP-MS kolonou umožňuje rychlou, citlivou a vysoce přesnou kvantifikaci paclitaxelu v lidském séru. Metoda je vhodná pro klinické i výzkumné aplikace a nabízí vynikající výtěžnost i opakovatelnost.

Reference

V původním textu nebyly uvedeny žádné literární zdroje.