A Sensitive and Efficient Method to Analyze THC and THCCOOH in Oral Fluid Using LC-MS/MS in Forensic Toxicology Laboratories

Význam tématu

Analýza THC a jeho metabolitu THCCOOH v orální tekutině je klíčová pro rozlišení aktivní konzumace konopí od pasivní expozice. Přidání kvantifikace THCCOOH eliminuje falešně pozitivní výsledky vyvolané náhodným vdechnutím kouře.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo vyvinout citlivou a efektivní LC-MS/MS metodu umožňující simultánní kvantifikaci THC a THCCOOH v orální tekutině s jednoduchou a rychlou přípravou vzorku vhodnou pro forenzní laboratoře.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky orální tekutiny byly smíchány s pufrem a interna­lními standardy, proteiny sráženy acetonitrilem a řešení upraveno 1% roztokem hydroxidu amonného. Extrakce proběhla na SOLAµ SAX SPE destičce bez předkondicionování. Chromatografie byla prováděna na UHPLC UltiMate 3000RS s accucore RP-MS kolonkou. Detekce ve SRM režimu na TSQ Quantiva MS s HESI zdrojem (negativní mód pro THCCOOH, pozitivní pro THC).

Hlavní výsledky a diskuse

Limit kvantifikace dosáhl 10 pg/mL pro THCCOOH a 0,5 ng/mL pro THC. Lineární rozsahy byly 0,05–10 ng/mL pro THCCOOH a 5–1000 ng/mL pro THC s přesností kalibrace do 15 %. Intra- i inter-assay RSD byly lepší než 10 %. Obnova THCCOOH se pohybovala mezi 70 – 97 %, THC mezi 33 – 42 %. Matricové efekty pro THCCOOH byly minimální (86 – 113 %), pro THC docházelo k potlačení iontů (64 – 71 %), které bylo odstraněno použitím interna­lního standardu.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda eliminuje časově náročné kroky jako sušení či deriva­tizaci, zkracuje přípravu vzorku a zachovává vysokou citlivost. Současná kvantifikace THC a THCCOOH umožňuje spolehlivé soudně-toxikologické hodnocení orálních vzorků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit o další kanabinoidy a jejich metabolity, integrovat do plně automatizovaných pracovníků linek a dále snižovat LOQ za pomoci vysoce výkonných MS systémů. Využití HRMS a iontové hybridní techniky poskytne širší škálu analytických markerů.

Závěr

Popsaná LC-MS/MS metoda představuje citlivý, rychlý a robustní postup pro současnou analýzu THC a THCCOOH v orální tekutině bez nutnosti deriva­tizace a složité přípravy, což výrazně zjednodušuje forenzní rutinu.

Reference

• 1. Moore C et al Cannabinoids in oral fluid following passive exposure to marijuana smoke Forensic Sci Int 2011 212(1-3) 227-30
• 2. Day D et al Detection of THCA in oral fluid by GC-MS-MS J Anal Toxicol 2006 30(9) 645-50
• 3. Moore C et al Analytical procedure for the determination of 11-nor-Δ9-tetrahydrocannabinol-9-carboxylic acid in oral fluid specimens J Anal Toxicol 2006 30(7) 409-12
• 4. Coulter C Garnier M Moore C Analysis of tetrahydrocannabinol and its metabolite 11-nor-Δ9-THC-9-carboxylic acid in oral fluid using LC-MS/MS J Anal Toxicol 2012 36(6) 413-7
• 5. Lee PD et al Simultaneous determination of Δ9-THC and 11-nor-9-carboxy-Δ9-THC in oral fluid using isotope dilution LC-MS/MS Anal Bioanal Chem 2012 402(2) 851-9
• 6. Concheiro M et al Simultaneous quantification of Δ9-THC 11-nor-9-carboxy-THC cannabidiol and cannabinol in oral fluid by microflow-LC-HRMS J Chromatogr A 2013 1297 123-30