The Use of ISOLUTE® HM-N for Rapid Sample Preparation

Význam tématu

Podporovaná extrakce kapalina-kapalina (SLE) představuje moderní způsob přípravy vzorků k analýze lipofilních sloučenin v komplexních vodných matricích. Díky materiálu ISOLUTE HM-N lze eliminovat emulze, minimalizovat čas procedury a zvýšit reprodukovatelnost ve srovnání s klasickými separačními nálevkami.

Cíle a přehled studie

Studie demonstruje využití modifikované křemeliny ISOLUTE HM-N pro rychlou přípravu vzorků pomocí SLE. Cílem je ukázat:

• zachycování a oddělení vodné fáze na hydrofilním materiálu,
• efektivní přenos analyzátů do organické fáze bez tvorby emulzí,
• univerzálnost v různých matricích, včetně biologických tekutin a viskózních vzorků.

Použitá metodika

Extraktivní postup se skládá ze tří kroků:

• nanesení vodného vzorku (max. 75 % výšky vrstvy adsorbentu) a vsáknutí (5–15 min),
• nanesení nemísitelného organického elučního činidla (doporučené objemy dle kapacity kolony: 3–40 mL),
• sběr eluátu s analyty, bez vzniku emulzí.

Pro ionizovatelné sloučeniny se využívá úprava pH o 2 jednotky od pKa (phosphátový pufr pH 2–4 pro kyseliny, NaOH 0,5 M pro báze).

Použitá instrumentace

• Kolony ISOLUTE HM-N v objemových formátech 0,3–20 mL, materiál stabilní v pH 1–13, částice ~90 μm.
• Rack Biotage pro až 20 kolonek s nerezovými nebo PTFE jehlami a volitelnými stopcocky.
• Možno kombinovat s ASE, SFE a běžnou LC-MS/MS či GC-MS aparaturou.

Hlavní výsledky a diskuse

SLE na HM-N dosahuje:

• vysoké retence vodné fáze a čistého přenosu analyzátů do organické fáze,
• eliminace emulzí díky velkému povrchovému rozhraní,
• vysoké výtěžnosti (> 95 %) pro lipofilní i ionizovatelné sloučeniny.

Metoda byla ověřena na biologických matricích (plasma, moči), viskózních vzorcích (mléko, emulze) i vodných roztocích reaktantů.

Přínosy a praktické využití metody

• rychlá a reprodukovatelná příprava vzorků bez separační nálevky,
• snadné škálování a paralelní zpracování,
• minimální potřeba optimalizace elučních rozpouštědel,
• široká kompatibilita s LC-MS/MS, GC-MS a dalšími analytickými technikami.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření do vysokopropustných laboratoří, integrace se zautomatizovanými systémy (robotizované pipetovací nástroje) a rozvoj speciálních modifikací materiálu pro cílené analyty.

Závěr

Podpora extrakce kapalina-kapalina pomocí ISOLUTE HM-N nabízí efektivní, škálovatelnou a univerzální metodu pro přípravu vzorků v analytické chemii. Její schopnost eliminovat emulze a vysoká retence vodné fáze zvyšují spolehlivost a rychlost analýzy.

Reference

• Technical Note TN118.V.1, Biotage, 2020.