Doxorubicin in Human Serum Using SOLA and Hypersil GOLD Column

Význam tématu

Stanovení doxorubicinu v lidském séru je klíčové pro sledování farmakokinetiky tohoto protinádorového antibiotika a optimalizaci dávek v klinických studiích.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout rychlou, přesnou a reprodukovatelnou metodu pro extrakci a kvantifikaci doxorubicinu z lidského séra kombinací SOLA SPE karet a chromatografické kolony Hypersil GOLD s celkovou dobou analýzy pouze 4 minuty.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika připravy vzorku:

• SPE: SOLA 10 mg/1 mL karty; kondicionování metanol, ekvilibrace vodou, naložení 200 µL séra, promytí vodou/methanolem (90:10) a eluční fáze metanol + 0,1 % kyseliny mravenčí.

Chromatografické podmínky:

• Kolona: Hypersil GOLD 3 µm
• Mobilní fáze: A) 25 mM acetát amonný, B) acetonitril, gradient od 20/80 k 40/60 a zpět.
• Flow rate 1,5 mL/min, objem injekce 25 µL, teplota ambient.
• Detekce fluorescenčně: ex. 480 nm, em. 560 nm.

Instrumentace

• Pumpa Thermo Scientific Accela 600
• Autosampler CTC
• Sloupec Hypersil GOLD
• Software ChromQuest 5

Hlavní výsledky a diskuse

Lineární rozsah metody byl pro koncentrace 1–100 ng/mL s korelačním koeficientem r2 = 0,9991. Jednoúrovňová kontrola přesnosti (20 ng/mL) dosáhla průměrné hodnoty 20,2 ng/mL (101,2 %) a relativní standardní odchylky 6,9 %. Retenční čas doxorubicinu byl 2,85 min a interního standardu daunorubicinu 3,38 min.

Přínosy a praktické využití metody

• Krátká doba přípravy a analýzy (4 min).
• Nižší spotřeba elučního činidla a nižší náklady na spotřební materiál.
• Vysoká čistota extraktů a odstraňování endogenních interferencí.
• Vysoká reprodukovatelnost a přesnost vhodné pro bioanalytická a klinická pracoviště.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření metodiky na další anthracyklinová léčiva, integrace plně automatizovaných SPE systémů, miniaturizace a multiplexní analýza více sloučenin v séru a dalších biologických maticích.

Závěr

Metoda založená na SOLA SPE kartách a kolóně Hypersil GOLD poskytuje rychlé, citlivé a spolehlivé stanovení doxorubicinu v lidském séru, což je přínosné pro farmakokinetické studie a terapeutické monitorování.

Reference

1. Barpe DR, Rosa DD, Froehlich PE. Pharmacokinetic evaluation of doxorubicin plasma levels in normal and overweight patients with breast cancer and simulation of dose adjustment by different indexes of body mass. Eur J Pharm Sci. 2010;41(3–4):458–463.
2. Current Cancer. Pharmacokinetic evaluation of doxorubicin plasma levels in normal and overweight patients with breast cancer; Dated 06/09/2011.