Příprava vzorků, Spotřební materiál
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceThermo Fisher Scientific
Význam tématu
Bioanalytická extrakce vzorků ze složitých matric, jako jsou krevní plazma či moč, je zásadní pro spolehlivou LC-MS analýzu. Konvenční SPE produkty často trpí problémy s ucpáváním, nevyrovnaným plnidlem a fosfolipidovým potlačením signálu. Inovativní fritless polymerová technologie SOLA a SOLAμ minimalizuje selhání vzorku, zvyšuje čisticí účinnost a reprodukovatelnost při vysokopropustných bioanalytických postupech.
Cíle a přehled studie / článku
Článek popisuje vlastnosti a výhody Thermo Scientific™ SOLA™ a SOLAμ™ SPE kazet a destiček. Hlavním cílem bylo ukázat, jak proprietární výroba vytváří homogení sorpční vrstvu bez potřeby fritů, zlepšuje úroveň čištění, snižuje spotřebu rozpouštědel a zvyšuje citlivost a reprodukovatelnost extrakcí v bioanalytických pracovních postupech.
Použitá metodika a instrumentace
Ultramikroeluce a kazetová SPE na polymerní sorbenty HRP, SCX, SAX, WCX a WAX v bed weightech 2 mg, 10 mg a 30 mg.
- Equilibrace: voda či roztok upraveného pH
- Load: vzorek 0,05–2 mL aplikovaný stabilní rychlostí vakuového systému (~1 kapka/s)
- Washing: vodné a organické mycí kroky (5–25 % organického rozpouštědla)
- Eluce: methanol/acetonitril nebo upravené směsi v objemech 12,5–500 µL
LC-MS/MS instrumentace:
- HPLC systém: Thermo Scientific™ Dionex™ UltiMate™ 3000 RSLC
- Kolona: Thermo Scientific™ Accucore™ RP-MS 50 × 2,1 mm, 2,6 µm
- Ochranná kolona: Accucore RP-MS Defender Cartridge
- MS: Thermo Scientific™ TSQ Vantage™ Triple-Stage Quadrupole
Hlavní výsledky a diskuse
SOLA produkty dosahují oproti konvenčnímu SPE:
- Vyšší reprodukovatelnost (%RSD 1–5 % vs 8–22 %)
- Vyšší čistota extraktu s minimálními matrix efekty
- Nižší objemy elučních rozpouštědel (25–150 µL) a zkrácení doby suchého zbytnění
- Možnost vysoké nálože (až 2 mL plazmy či moči) bez ztráty efektivity
- Stálá výkonost při různých technikách nanášení vzorku (neat vs „messy“)
Ukázalo se čistší MS konturové plochy, menší carry-over a robustní obnovy analytů jako vitaminy, opioidní analgetika a protizánětlivé látky.
Přínosy a praktické využití metody
SOLA a SOLAμ SPE umožňují vysokopropustné bioanalytické workflow s vysokou citlivostí a nízkými provozními náklady:
- Rychlejší příprava vzorku, méně reanalýz
- Zvýšená citlivost díky nízkým elucím a možnosti 20× koncentrovat vzorek
- Minimální maintenance LC-MS systému díky odstranění fosfolipidů
- Flexibilita fází (HRP, SCX, SAX, WCX, WAX) pro různé skupiny sloučenin
Budoucí trendy a možnosti využití
Další rozvoj se očekává v:
- Automatizaci SPE procesů a integraci s robotickými platformami
- Další miniaturizaci a on-line spojení s kapilárními LC-MS systémy
- Vývoji nových polymerových sorbentů pro cílené odstranění specifických rušivých látek
- Využití strojového učení pro optimalizaci výběru SPE fází a parametrů
Závěr
Proprietární fritless technologie SOLA a SOLAμ SPE přináší výrazné zlepšení v reproducibilitě, čistotě extraktu, citlivosti a provozní efektivitě bioanalytických metod. Vyšší spolehlivost a snížená spotřeba rozpouštědel přispívají k nižším nákladům a kvalitnějším výsledkům v biofarmaceutickém i klinickém výzkumu.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.