HPLC - UV-Vis absorption and charged aerosol detection

Význam tématu

Spolehlivá analýza potravních doplňků a botanických přírodních produktů je klíčová pro zajištění jejich kvality, bezpečnosti a účinnosti. Různorodost surovin, variabilita složení a nedostatek standardů představují významné analytické výzvy. Vývoj univerzálních a citlivých chromatografických metod pomáhá překonat tyto překážky a zlepšit kontrolu surovin i finálních přípravků.

Cíle a přehled studie / článku

Notebook představuje přehled aplikací HPLC a UHPLC při analýze doplňků stravy a botanických přípravků. Klíčovým cílem je popsat, jak lze kombinovat chromatografické techniky se dvěma různými detektory (UV-Vis absorbance a Charged Aerosol Detector) pro rozšíření měřitelného spektra látek a zjednodušení kvantifikace i u sloučenin bez silného chromoforu.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci se využívají různé sloupcové fáze: převážně C18/C30, C8, HILIC a mixed-mode akrylátové nebo fenylové fáze. Jako detektory jsou popsány

• UV-Vis diodový array (DAD) a proměnné vlnové délky (VWD)
• Charged Aerosol Detector (CAD) pro univerzální detekci netěkavých sloučenin

Pro přípravu vzorků se používá Accelerated Solvent Extraction (ASE) či ultrazvuková extrakce a online či offline nejčastěji gradientní eluce. V řadě aplikací byla použita UHPLC platforma Vanquish a detektory ISQ EC/EM.

Hlavní výsledky a diskuse

Byly úspěšně validovány metody pro široké spektrum sloučenin: vitamíny, flavonoidy, taniny, alkaloidy, terpeny, triterpeny i glykozidy. CAD umožnil kvantifikovat látky bez dostupných standardů a zlepšil liniaritu u gradientních elucí díky inversnímu gradientu. UV-Vis dodatky zvýšily selektivitu u látek s chromofory.

Přínosy a praktické využití metody

• Univerzální detekce širokého spektra přírodních látek bez potřeby individuálních standardů
• Zrychlení analýzy díky UHPLC a verměrnému průtoku
• Zvýšení reproducibility a kvality kontroly přípravků QA/QC
• Možnost autentizace a záchytu padělků pomocí metabolomických profilů

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj metod může směřovat k online kombinaci více detektorů, většímu nasazení HRMS pro strukturální identifikaci, plně automatizovaným workflow s ASE a dalšími přípravnými moduly a pokročilému datovému zpracování metabolomických přístupů.

Závěr

Popsané chromato­grafické kombinace s CAD a UV-Vis nabízejí robustní, flexibilní a citlivé řešení pro analýzu komplexních botanických a doplňkových přípravků. Mohou podpořit moderní QA/QC, autentizaci surovin a bezpečnost produktů.

Reference

• Thermo Fisher Scientific Applications Notebook: Dietary supplements and botanical natural products
• Charged aerosol detection – factors affecting uniform response, TN72806, Thermo Fisher Scientific
• Why use Charged Aerosol Detection with Inverse Gradient?, TN73449, Thermo Fisher Scientific
• AN73174: Determination of olive oil purity based on triacylglycerols profiling by UHPLC–CAD and PCA