Fast LC-HRAM-MS quantification of 36 antidepressants in human plasma using the Orbitrap Exploris 120 mass spectrometer for clinical research

Význam tématu

Antidepresiva patří k nejčastěji předepisovaným psychoaktivním látkám a jejich kvantifikace v lidské plazmě je klíčová pro výzkum terapeutického monitoru, optimalizaci dávek a minimalizaci nežádoucích účinků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a validovat rychlou, spolehlivou a citlivou LC-HRAM-MS metodu pro simultánní kvantifikaci 36 antidepresiv ve vzorcích lidské plazmy. Metoda využívá Orbitrap Exploris 120 pro vysoké rozlišení a přesnost měření.

Použitá instrumentace

• UHPLC: Thermo Scientific Vanquish Flex Binary
• Chroma kolona: Hypersil GOLD Phenyl 2,1×100 mm, 1,9 μm, 40 °C
• Mobilní fáze: A – voda s 5 mM HCOONH4 a 0,1 % HCOOH, B – methanol s 5 mM HCOONH4 a 0,1 % HCOOH
• MS detektor: Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120 se zdrojem HESI, pozitivní režim, full scan 100–500 m/z, rozlišení 60 000 při m/z 200
• Software: Thermo Scientific TraceFinder 5.1
• Kalibrátory a interní standardy: RECIPE ClinMass, mix deuterovaných standardů

Metodika

Vzorky plazmy (50 μL) podstoupily proteinovou precipitaci acetonitrilem s interními standardy, poté centrifugaci a přímou injekci 2 μL do LC-MS. Chromatografie probíhala gradientem 10→95 % fáze B při 0,5 mL/min v čase 6,5 min.

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární rozsah: R2 > 0,9932 pro všechny látky
• Kalibrace: přesnost 92,9–106,6 %, preciznost < 7,3 %
• LLOQ: možnost snížit pod nejnižší kalibrační úroveň, odhadované meze 0,091–32,2 μg/L
• Intra-assay: přesnost 85,2–113,9 %, preciznost < 6,5 %
• Inter-assay: přesnost 89,2–114,8 %, preciznost < 6,4 %
• Rychlost: méně než 7 minut na vzorek

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé a spolehlivé sledování hladin antidepresiv v klinickém výzkumu, výzkumu TDM či farmakokinetických studiích. Jednoduchá příprava vzorků a robustní instrumentace podporují vysokou průchodnost vzorků a důvěryhodnost dat.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření panelu látek a nižších LLOQ
• Automatizace přípravy vzorků
• Retrospektivní analýza HRAM dat pro nové analyty
• Implementace v rutinních klinických laboratořích
• Další vylepšení v oblasti rychlosti a citlivosti Orbitrap technologie

Závěr

Vyvinutá metoda LC-HRAM-MS na přístrojové konfiguraci Orbitrap Exploris 120 a Vanquish Flex je rychlá, citlivá a přesná pro simultánní kvantifikaci 36 antidepresiv v lidské plazmě. Splňuje požadavky klinického výzkumu i terapeutického monitoringu.

Reference

• Barcenas M., Olin M. Fast LC-HRAM-MS quantification of 36 antidepressants in human plasma using the Orbitrap Exploris 120 mass spectrometer for clinical research. Thermo Fisher Scientific Technical Note TN66062, 2021.