Evaluation of Highly Stable Zwitterionic HILIC Columns Based on Hybrid Organic/Inorganic Particles

Význam tématu

Hydrophilic Interaction Chromatography (HILIC) je široce využívaná technika pro účinnou separaci vysoce polárních sloučenin, zejména v metabolomických studiích. Robustní a stabilní HILIC fáze jsou klíčové pro dosažení reprodukovatelnosti, vysoké účinnosti a spolehlivé analýzy citlivých analyzovaných látek, včetně kovově citlivých metabolitů.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout a ověřit novou sulfobetaine HILIC stacionární fázi založenou na hybridních organicko/anorganických BEH částečkách, modifikovaných technologií MaxPeak™ Premier. Studie porovnává nové Atlantis™ Premier BEH Z-HILIC kolony s existujícími sulfobetaine HILIC produkty od různých výrobců ve smyslu retence, selektivity, stability a reprodukovatelnosti.

Použitá metodika a instrumentace

Pro porovnání bylo použito sedm různých sloupců 1,7–1,9 μm (2,1 × 50 mm) se sulfobetaine fází:

• Atlantis Premier BEH Z-HILIC (Waters) s MaxPeak Premier technologií
• BEH Z-HILIC (Waters)
• ZIC™-pHILIC (Merck)
• Syncronis™ HILIC (Thermo Scientific)
• Poroshell™ 120 HILIC-Z (Agilent)

Analýzy proběhly standardní vodnou organickou eluentní striktně v HILIC režimu, detekce UV (Absorbance Units) a test stability při pH 11/70 °C.

Hlavní výsledky a diskuse

Nové Atlantis Premier BEH Z-HILIC kolony prokázaly:

• Silnou retenci a vylepšenou selektivitu pro nukleosidy, aminokyseliny a další polární metabolity.
• Vysokou účinnost až 245 000 platů/m při 1,7 μm částicích.
• Výjimečnou stabilitu v širokém pH rozmezí (pH 2–10) i po 35 hodinách při extrémních podmínkách (pH 11/70 °C).
• Vynikající reprodukovatelnost mezi výrobními šaržemi.
• Zvýšené recoveries kovově citlivých sloučenin díky pečlivě optimalizované povrchové chemii.

Přínosy a praktické využití metody

Díky kombinaci stability v širokém pH rozsahu, vysoké účinnosti a konzistentní retence jsou Atlantis Premier BEH Z-HILIC kolony ideální pro:

• Metabolomické a lipidomické aplikace vyžadující spolehlivou separaci polárních metabolitů.
• QA/QC analýzy v potravinářství, farmaceutickém průmyslu a environmentálních studiích.
• Práce s kovově citlivými analyty bez ztráty recovery a výkonu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj hybridních částic s cílem zvýšit účinnost a zlepšit kompatibilitu s masovou spektrometrií při nižších průtocích. Vývoj nano-HILIC platforem a kombinace s mikrofluidickými systémy poskytne vyšší citlivost pro trasovací metabolity a vysokoobjemové screeningové studie.

Závěr

Atlantis Premier BEH Z-HILIC kolony nabízejí unikátní kombinaci silné retence polárních sloučenin, širokého pH stability, vysoké účinnosti a reprodukovatelnosti mezi šaržemi. Tyto vlastnosti je předurčují k použití v náročných metabolomických aplikacích a všude tam, kde je nutná spolehlivá separace kovově citlivých analytů.

Reference

Waters application note 720007311: "Introducing Atlantis BEH Z-HILIC: a Zwitterionic Stationary Phase Based on Hybrid Organic/Inorganic Particles", Waters Corporation, July 2021