CHARAKTERIZACE BIOLOGICKY AKTIVNÍCH LÁTEK V ŘEPÍKU LÉKAŘSKÉM

Význam tématu

Řepík lékařský (Agrimonia eupatoria) patří mezi významné léčivé rostliny díky vysokému obsahu polyfenolických látek, zejména taninů, flavonoidů a fenolových kyselin. Jeho extrakty nacházejí široké uplatnění v tradiční medicíně pro protizánětlivé vlastnosti a podporu hojení chronických ran. Pro optimalizaci biologické aktivity je klíčové detailně stanovit profil těchto bioaktivních sloučenin.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo srovnat obsah a složení biologicky aktivních látek ve dvou typech vodných extraktů řepíku – výluhu a odvaru – pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie spojené s vysokorozlišujícím tandemovým hmotnostním spektrometrem (UHPLC-HRMS/MS). Studie tak poskytuje přehled o rozdílech v chemickém složení přípravků používaných v terapeutické praxi.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky nati řepíku zakoupené z komerční sítě byly sušené a zpracovány dvěma způsoby:

• Výluh: zalití 1 l vroucí vody, louhování 15 min.
• Odvar: vsypání do 1 l vroucí vody a povaření 10 min.

Po filtraci byly extrakty analyzovány:

• Chromatografie UHPLC (Dionex UltiMate 3000) s kolónou HSS T3 (2,1×100 mm, 1,8 µm), teplota 40 °C, injekce 2 µl.
• Mobilní fáze: 5 mM mravenčan amonný ve vodě (A) a v methanolu (B) s 0,1 % mravenčí kyseliny, gradient od 95 % A/5 % B do 100 % B a zpět.
• Detekce: TripleTOF 6600 (SCIEX) s ESI v pozitivním i negativním módu, m/z 100–1200, kolizní energie 35 eV (±15 eV).
• Vyhodnocení dat: PeakView v.2.2 s modulem MasterView, databáze 37 cílových sloučenin.

Hlavní výsledky a diskuse

Bylo potvrzeno 16 bioaktivních látek: 8 flavonoidů (např. apigenin, kaempferol, kvercetinové glykosidy), 2 taniny (prokyanidiny) a 6 fenolových kyselin (např. chlorogenová, p-kumaroylchinová). Profil extraktů byl obdobný, lišil se pouze celkovou intenzitou signálů, přičemž výluh vykazoval vyšší obsah sledovaných metabolitů. Dominantní skupinou byly flavonoidy (59–63 %), dále fenolové kyseliny (23 %) a taniny (13–16 %).

Přínosy a praktické využití metody

UHPLC-HRMS/MS umožňuje rychlou, citlivou a cílenou identifikaci a semikvantifikaci klíčových bioaktivních sloučenin v rostlinných extraktech. Tato metoda přispívá k validaci tradičních postupů přípravy bylinných přípravků a může sloužit k řízení kvality ve farmaceutickém i potravinářském sektoru.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalším krokem bude necílový screening (fingerprinting) kompletního metabolomu extraktů a robustní kvantitativní analýza za pomoci standardních látek. Integrace dat s biochemickými testy potvrdí biologickou aktivitu a umožní navrhnout optimální extrakční postupy pro terapeutické aplikace.

Závěr

Cílový screening UHPLC-HRMS/MS potvrdil přítomnost a relativní zastoupení 16 hlavních bioaktivních sloučenin v odvaru a výluhu řepíku lékařského. Metoda dokáže spolehlivě rozlišit složení extraktů a poskytuje základ pro další kvantitativní a biologické studie.

Reference

1. Muruzovic M.Z., Mladenovic K.G., Stefanovic O.D., Vasic S.M., Comic L.R. J. Food Drug Anal. 24, 539 (2016).
2. Tobyn G., Denham A., Whitelegg M. Medical Herbs. Churchill Livingstone, Edinburgh 2011.
3. Kuczmannova A. et al. Molecules 20, 20538 (2015).
4. Paluch Z. et al. Physiol. Res. 69, 555 (2020).
5. Correia H. et al. Biomed. Chromatogr. 20, 88 (2006).
6. Santos T.N. et al. Evid.-Based Complement. Alternat. Med. 2017, 8309894.