A High-Throughput Potency Determination of 19 Cannabinoids in Hemp Plant Material and Finished Tinctures using LabSolutions and the Cannabis Analyzer for Potency

Význam tématu

Rychlé a přesné stanovení obsahu kanabinoidů v rostlinných materiálech konopí a hotových tinkturách je klíčové pro zajištění kvality, bezpečnosti a účinnosti produktů. S rostoucí poptávkou po léčebně využitelných extraktech konopí a nástupem legislativních změn v roce 2018 vyvstala potřeba spolehlivých analytických postupů schopných kvantifikovat i menší kanabinoidy vedle CBD a THC.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem publikovaného postupu je rozšířit standardní HPLC metodu pro stanovení potence na 19 kanabinoidů v čase kratším než 8 minut (včetně proplachu). Metoda byla aplikována na komerčně dostupný sušený květ konopí i na olejové tinktury, aby se zhodnotila její robustnost, linearita a opakovatelnost.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci a detekci kanabinoidů byl použit Shimadzu Cannabis Analyzer for Potency™ s UV-VIS detektorem:

• Kolona NexLeaf CBX 150 × 4,6 mm, 2,7 μm + guard kolona
• Mobilní fáze A: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě; B: 0,1 % kyselina mravenčí v acetonitrilu
• Gradient: 70→80 % B /5 min, 80→85 % B /1 min, návrat na 70 % B /0,1 min + 2 min proplach
• Tok 1,5 mL/min, teplota 50 °C, objem injekce 5 μL, detekce při 220 nm
• Standardy: 19 referenčních kanabinoidů ve vodě/acetonitrilu s koncentracemi 250–10 000 mg/L

Pro přípravu vzorků se u suchého květu použilo mletí s kovovými kuličkami, extrakce metanolem, filtrace a 100× zředění. Tinktury se připravily 1000× ředěním isopropanolem a methanolem.

Hlavní výsledky a diskuse

Při šestiúrovňové kalibraci (0,5–80 mg/L) s váženou regresí bylo dosaženo koeficientů R2 ≥ 0,9949 a průměrného RSD 2,5 %. Kvalita (accuracy) všech 19 kanabinoidů se pohybovala v intervalu 89,8–107,4 %. Opakovatelnost retencí i ploch byla vysoká, jak dokazují překryvy sedmi opakovaných injekcí.
Analýza dvou suchých vzorků květu odhalila látky s celkovou CBD potencí až 77,9 % (wt. %) a případy překračující legálně stanovenou hranici THC 0,3 % (Farm Bill 2018). Komerční CBD tinktura prokázala 67,9 mg/mL CBD a 1,61 mg/mL THC.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje laboratorím vysokou propustnost vzorků (čas analýzy < 8 min) a současné stanovování širokého spektra kanabinoidů včetně méně běžných analogů. Díky nízké spotřebě mobilní fáze a jednoduché přípravě vzorků lze snadno integrovat do rutinní kontroly kvality v komerční výrobě a výzkumu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s automatizovanými systémy pro ještě vyšší kapacitu analýz
• Rozšíření panelu o další kanabinoidy a metabolity (např. glukuronidy)
• Adaptace metody na HPLC-MS/MS pro vyšší selektivitu a nižší limity detekce
• Využití v regulovaných oblastech medicíny a farmacie pro standardizaci produktů

Závěr

Popisovaný HPLC postup s použitím Shimadzu Cannabis Analyzer for Potency™ představuje robustní, rychlý a přesný nástroj pro kvantifikaci 19 kanabinoidů ve vzorcích suchého květu i olejových tinktur. Výsledky potvrzují splnění požadavků na linearitu, opakovatelnost i přesnost, což z metody činí vhodný nástroj pro rutinní analýzu potence konopných produktů.

Reference

• Shimadzu Application Note No. SSI-HPLC-040: High-Throughput Potency Determination of 19 Cannabinoids in Hemp Plant Material and Finished Tinctures using LabSolutions and the Cannabis Analyzer for Potency™, Shimadzu Corporation, 2020