New Pharmaceutical and Food & Beverage Applications for SPME/HPLC

Význam tématu

Solid phase microextraction (SPME) představuje moderní techniku vzorkování, která minimalizuje spotřebu organických rozpouštědel a zkracuje dobu přípravy vzorku. V kombinaci s vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií (HPLC) rozšiřuje možnosti analýzy slabě těkavých nebo termolabilních látek, které nelze spolehlivě stanovit běžnými GC metodami.

Cíle a přehled studie / článku

Článek popisuje implementaci nového rozhraní SPME/HPLC a aplikační příklady:

• monitorování tricyklických antidepresiv v séru,
• stanovení antioxidantů (BHA, BHT) v potravinách,
• analýzu kyseliny benzoové a kofeinu v nealkoholických nápojích.

Použitá metodika a instrumentace

Pro extrakci byl použit SPME vláknový nosič 40 μm PDMS/DVB-HPLC. Po přesném ozkoušení manuálního držáku je analyzátor spojen s HPLC rozhraním pro dynamickou desorpci.

• Vzorkování:
• immerzní extrakce, 15–30 min při rychlém míchání
• přídavek metanolu pro denaturaci sérových proteinů
• Desorpce:
• dynamická desorpce mobilem (methanol–acetonitril nebo acetonitril–vodný pufr)
• trvání 1–10 min
• Chromatografická část:
• kolony SUPELCOSIL LC-PCN nebo LC-18 (3–5 μm částice, 15–25 cm × 4,6 mm ID)
• mobilní fáze (ACN, MeOH, vodný fosfátový nebo octanový pufr, gradient/izokratická fáze)
• detekce UV při 215–280 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza tricyklických antidepresiv (desipramin, nordoxepin, nortriptylin) v séru splnila požadavky na přesnost (<10 % RSD) a liniový rozsah (50–400 ng/mL). Recovery faktory byly stabilní a umožnily rychlou a opakovatelnou analýzu bez nutnosti laboratorních extrakcí. Stanovení BHA a BHT v oleji a prášcích pro nápoje bylo dosaženo srovnatelnou citlivostí jako tradiční LLE, avšak s výraznou úsporou rozpouštědel. Současné extrakce kyseliny benzoové a kofeinu v dietní koly ukázaly selektivitu 40 μm PDMS/DVB-HPLC vlákna pro široké spektrum sloučenin.

Přínosy a praktické využití metody

S použitím SPME/HPLC lze dosáhnout:

• minimalizace spotřeby organických rozpouštědel,
• zkrácení doby přípravy vzorku,
• zlepšenou čistotu analyzátu oproti LLE,
• rozšíření možností analýzy termolabilních a málo těkavých látek.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda SPME/HPLC má potenciál pro další rozvoj:

• integrace s auto-sampler systémy pro vysokou automatizaci,
• aplikace v environmentální chemii pro stopová stanovení kontaminantů,
• rozšíření chemie vláken o specifické fázové modifikace,
• kombinace s hmotnostní detekcí (LC-MS) pro vyšší selektivitu a citlivost.

Závěr

Nové rozhraní SPME/HPLC umožňuje efektivní stanovení nestabilních a málo těkavých látek v biomedicínských, farmaceutických i potravinářských aplikacích. Kombinace rychlé extrakce, nízké spotřeby rozpouštědel a vysoké opakovatelnosti zajišťuje moderní, ekologický a ekonomický přístup k analýze složitých matric.

Reference

1. Supelco Bulletin 901 – technické podklady k rozhraní SPME/HPLC.
2. Y. Gora-Maslak et al., Headspace SPME/GC determination of tricyclic antidepressants, Supelco Reporter Vol. 15, No. 6, 1996.
3. AOAC Official Method 983.15, AOAC Official Methods of Analysis, Supplement March 1995.
4. AOAC Official Method 983.16, AOAC Official Methods of Analysis, Supplement March 1995.