Simple, Fast, and Clean Extraction of Synthetic Cannabinoids from Whole Blood Using Oasis PRiME HLB

Význam tématu

Analýza syntetických kanabinoidů v krvi je klíčová pro forenzní a klinickou toxikologii, kde se vyžaduje citlivé, rychlé a reprodukovatelné stanovení těchto látek v komplexním biologickém matrice. Metoda musí minimalizovat rušivé matrix efekty a odstraňovat interferující látky, zejména fosfolipidy, aby byla zajištěna dlouhodobá stabilita chromatografického systému a přesnost kvantifikace.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout jednoduchý tříkrokový SPE protokol bez kondicionace a ekvilibrace pro extrakci 22 syntetických kanabinoidů a jejich metabolitů z plné krve. Studie hodnotila výtěžky, matrix efekty, účinnost odstranění fosfolipidů, přesnost a přesnost kvantifikace napříč širokým koncentracním rozsahem.

Použitá metodika

Vzorek plné krve byl lyzován přidáním roztoku síranu zinečnatého/amonného octanu a precipitačně ošetřen acetonitrilem. Po centrifugaci byl supernatant naředěn vodou a přímo naložen na Oasis PRiME HLB sorbent bez předchozí kondicionace. Mytí probíhalo dvakrát 25:75 MeOH:voda a eluace 90:10 ACN:MeOH. Eluát byl vysušen dusíkem a rekonstituován v 30 % ACN.

Použitá instrumentace

• Oasis PRiME HLB 30 mg µElution destičky
• ACQUITY UPLC I-Class systém
• CORTECS UPLC C18 kolona 2.1×100 mm, 1.6 µm
• Xevo TQD hmotnostní spektrometr se zdrojem ESI pozitivní režim
• Software MassLynx a TargetLynx pro zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatografie umožnila rozložení všech 22 analytů do 7.5 min s celkovým cyklem 8.5 min. Průměrný výtěžek extrakce činil 91 % s průměrným %RSD 5 %. Matrix efekty byly v průměru 17 %, přičemž pouze dvě látky překročily 25 %. Oasis PRiME HLB odstranil více než 95 % fosfolipidů ve srovnání s proteinovou precipitací, což vede k čistším extraktům a nižšímu zanášení LC-MS systému. Kalibrační křivky byly lineární v rozmezí 0.2–100 ng/mL (R2 ≥0.99), limity kvantifikace kolem 0.1 ng/mL a bez použití deuterovaných vnitřních standardů byla přesnost QC v rozmezí 93–104 % s %RSD < 15 %.

Přínosy a praktické využití metody

Protokol je univerzální pro různé chemotypy syntetických kanabinoidů (neutrální, kyselé, bazické) a nevyžaduje úpravy pro nové analogie. Vysoká účinnost odstranění fosfolipidů prodlužuje životnost kolony a snižuje údržbu hmotnostního spektrometru. Metoda je vhodná pro forenzní laboratoře, klinické testování i QA/QC procesy v biomedicínských výzkumech.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření aplikace na nové generace syntetických kanabinoidů a jiné lipofilní drogy. Integrace s automatizovanými 96-well formáty může zvýšit propustnost analýzy. Další optimalizace by mohla zahrnovat online SPE-LC-MS řešení a rozšíření panelu o polarni metabolity.

Závěr

Oasis PRiME HLB umožňuje rychlou, jednoduchou a vysoce účinnou extrakci syntetických kanabinoidů z plné krve bez kondicionace sorbentu. Metoda dosahuje vysokých výtěžků, nízkých matrix efektů a vynikající kvantitativní výkonnosti, což přispívá k robustnosti a spolehlivosti forenzních a klinických analýz.

Reference

1. Danaceau JP, Chambers EE, Fountain KJ, Analysis of synthetic cannabinoids from urine for forensic toxicology using Oasis HLB µElution Plates and CORTECS UPLC Columns, Waters Application Note p/n 720004780EN