Comparing Orthogonality of Convergence Chromatography to Reversed-Phase LC

Význam tématu

Chromatografie s ortogonálními módy separace je zásadní pro analýzu farmaceutických látek a komplexních přírodních extraktů. Porovnání metod konvergenční chromatografie (UPC2) a reverzní fáze UPLC ukazuje, jak odlišné selektivity rozšiřují schopnost identifikovat a izolovat sledované látky.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat výhody UPC2 jako ortogonální separační techniky vůči běžné reverzní fázi UPLC. Sleduje se pořadí elučních špiček pomocí UV detekce a hmotnostní spektrometrie.

Použitá metodika a instrumentace

Pro analýzu byly použity:

• ACQUITY UPLC System s pod 2 µm částicemi pro reverzní fázi
• ACQUITY UPC2 konvergenční chromatografie s podobnými stacionárními fázemi
• ACQUITY SQD System pro hmotnostní spektrometrii

Vzorky farmaceutik i přírodních extraktů byly zpracovány přímou injekcí a analyzovány v paralelních bězích UPC2 a UPLC.

Hlavní výsledky a diskuse

U metoclopramidu se ukázalo, že UPC2 a UPLC vzájemně doplňují rozlišení nežádoucích příměsí. Některé špičky neoddělené v UPLC byly zřetelně vymezeny v UPC2 a naopak. Při analýze heřmánkového extraktu se prokázala roztříštěná korelace retenčních časů, což potvrzuje vysokou ortogonálnost. Pro izobarické sloučeniny s m/z 475 UPC2 odhalila další špičku, kterou UPLC nedokázala oddělit či odlišit.

Přínosy a praktické využití metody

Ortogonální přístup rozšiřuje možnosti izolace neznámých příměsí, usnadňuje nárůst metody na větší škálu, zvyšuje spolehlivost v QC a umožňuje kompatibilitu s MS detekcí při analýze přírodních produktů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší uplatnění UPC2 v oblastech metabolomiky, přípravě čistých látek pro strukturální charakterizaci, vývoji léčiv a komplexní kontrole kvality složitých matric.

Závěr

Konvergenční chromatografie UPC2 se ukázala jako efektivní ortogonální metoda vůči reverzní fázi UPLC. Kombinací obou technik lze dosáhnout úplného rozlišení špiček a podpořit proces vývoje a kontroly kvality farmaceutik i přírodních extraktů.

Reference

1. Jones MD, Potts W. UPC 2 Method Development for Achiral Impurity Analysis. Waters Application Note 720004577EN. 2013 Jan.