HPLC
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceShimadzu
Význam tématu
Červené víno obsahuje širokou škálu polyfenolických sloučenin, z nichž resveratrol je ceněný pro své antioxidační účinky a potenciál ovlivnit délku života. Rychlá a citlivá kvantifikace této látky je zásadní pro hodnocení kvality vína, nutriční analýzu i kontrolu jakosti.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem aplikace bylo vyvinout ultra rychlou chromatografickou metodu pro separaci a měření trans a cis resveratrolu v červeném víně. Využití UHPLC systému Nexera v kombinaci s fluorescenční detektorem RF-20Axs mělo zajistit krátký čas analýzy, vysoké rozlišení a citlivost.
Použitá metodika a instrumentace
- Úprava vzorku: Kyselá úprava vína kyselinou chlorovodíkovou, extrakce diethyletherem, odpaření a rekonstituce v 50 % methanolovém roztoku
- Kolona: Shim-pack XR-ODS III (150 mm × 2 mm I.D., částice 2,2 µm)
- Mobilní fáze: A – 0,2 % kyselina mravenčí ve vodě; B – 0,2 % kyselina mravenčí v acetonitrilu; gradient 23 % → 26 % → 40 % → 100 % fáze B za 4 minuty
- Podmínky: Průtok 0,7 ml/min, teplota kolony 60 °C, objem injekce 11 µl, maximální tlak 75 MPa
- Detekce: Fluorescenční detektor RF-20Axs při ex 300 nm, em 386 nm, teplota kyvety 20 °C
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda dokázala oddělit trans a cis resveratrol v čase kratším než 4 minuty s vysokým rozlišením. Chromatogram ukázal jasné a separované píky obou forem. Fluorescenční detekce poskytla vysokou citlivost i selektivitu, minimalizovala šum z matrix vína.
Přínosy a praktické využití metody
- Vysoká propustnost: Kompletní analýza za méně než 4 minuty umožňuje rychlou kontrolu velkého počtu vzorků
- Citlivost a selektivita: Spolehlivá detekce nízkých koncentrací resveratrolu
- Široké aplikace: Kontrola kvality v potravinářském průmyslu, výzkum biologicky aktivních látek
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se rozšíření ultra rychlých UHPLC metod na další bioaktivní polyfenoly a složité potravinové matrice. Kombinace s hmotnostní spektrometrií může zvýšit selektivitu a identifikaci neznámých sloučenin. Dále lze očekávat plnou automatizaci přípravy vzorků a integraci on-line systémů pro vysokopropustný provoz.
Závěr
Využití UHPLC kolony s 2,2 µm částicemi a fluorescenční detekce RF-20Axs umožnilo rychlou, citlivou a reprodukovatelnou analýzu resveratrolu v červeném víně. Metoda splňuje požadavky moderní průmyslové analytiky i výzkumných laboratoří.
Reference
- Shimadzu Corporation International Marketing Division. Ultra-High-Speed Analysis of Polyphenols in Wine. Application Data Sheet No.11, prosinec 2010.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.