Transfer of an Isocratic USP Assay from an Agilent 1100 Series LC System to a ACQUITY UPLC H-Class System: Analysis of Tioconazole and Related Impurities

Význam tématu

Modernizace analytických laboratoří často vyžaduje přenos zavedených USP metod z tradičních HPLC systémů na výkonnější UPLC platformy. Umožnění takového přechodu zachovává validitu analýz, zrychluje procesy a snižuje spotřebu mobilní fáze bez kompromisu v kvalitě výsledků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo přenést isokratickou USP metodu pro stanovení tiokonazolu a jeho organických nečistot z Agilent 1100 Series LC System na ACQUITY UPLC H-Class System tak, aby výsledky splňovaly všechny požadavky monografie USP a poskytovaly srovnatelnou separaci.

Použitá metodika

Metoda využívá isokratickou separaci na kolóně XBridge C18 (4,6 × 250 mm, 5 µm) při průtoku 0,75 mL/min, objemu injekce 20 µL a retenčním čase tiokonazolu v rozmezí 12–17 min. Mobilní fáze i kolóna byly temperovány pro zajištění stability retence.

Použitá instrumentace

• Agilent 1100 Series LC System: degasser G1322A, quaternary pump G1311A, autosampler G1313A, column compartment G1316A, DAD detektor G1315B, pasivní předehřívač (3 µL).
• ACQUITY UPLC H-Class System: Quaternary Solvent Manager 186015018, Sample Manager FTN 186015017, Column Heater 30 CH-A 186015045, PDA detektor 186015032, aktivní předehřívač a 50 µL nastavitelná smyčka.

Hlavní výsledky a diskuse

Oba systémy vykázaly velmi podobné chromatogramy pro stanovení tiokonazolu i organických nečistot. Průměrné retenční časy a relativní retenční časy se lišily pod 2 % (hranice 3–5 %). Kritická dvojice nečistot dosáhla rozlišení 1,4. Opakovatelnost retencí byla v obou systémech ≤0,2 % RSD, nižší variabilita byla zaznamenána na UPLC.
System suitability: teor. počet platů ≥10 000 (USP požadavek ≥1 000), tailing factor ≤2,0 % RSD – kritéria splněna na obou zařízeních.
Analýza organických nečistot prokázala shodu v kvantitě impurit B a C do 0,01 %, nečistota A byla pod mezí ignorování (0,05 %).

Přínosy a praktické využití metody

Přenos metody umožňuje zkrácení doby analýzy, snížení spotřeby mobilní fáze a zvýšení laboratorní kapacity. Laboratoře tak mohou modernizovat vybavení bez potřeby vývoje zcela nových postupů a přitom plně vyhovět požadavkům USP.

Budoucí trendy a možnosti využití

V budoucnu lze podobně přenášet další USP monografie mezi výrobci, integrovat metody s hmotnostní detekcí, automatizovat procesy a zavádět on-line monitorování kvality během výrobních operací.

Závěr

Studie prokázala, že přenos isokratické USP metody pro tiokonazol z Agilent 1100 Series LC System na ACQUITY UPLC H-Class System je možný bez kompromisů v kvalitě separace, splňuje všechna systémová a metodologická kritéria USP a podporuje efektivní modernizaci analytických laboratoří.

Reference

1. Official Monographs, USP 37 NF32 S2, United States Pharmacopeia and National Formulary, Baltimore, MD, 2014, p. 4968.
2. Easy Transfer of Standard HPLC Methods to the Agilent 1200 Series Rapid Resolution System, Agilent Technologies, Inc., 2006.
3. Chapter 621 CHROMATOGRAPHY, USP 37 NF32 S1, United States Pharmacopeia and National Formulary, Baltimore, MD, 2014, p. 6376–85.
4. 1100 Series DAD and MWD Reference Manual, Agilent Technologies, Germany, 2004.
5. ACQUITY UPLC Photodiode Array (PDA) Detector Instrument Specifications, Waters Corporation, Milford, MA, 2014.