Determination of Fipronil and its Metabolite Fipronil Sulfone in Eggs by Liquid Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry Using a Modified QuEChERS Method

Význam tématu

Fipronil je široce používaný insekticid, jehož výskyt v potravinách živočišného původu představuje vážné riziko pro zdraví spotřebitelů. Nález reziduí fipronilu a jeho metabolitu fipronil sulfonu v vejcích vyvolal rozsáhlé kontroly v EU a mimo ni. Spolehlivá, citlivá a rychlá analytická metoda je klíčová pro dodržování legislativních limitů (MRL) a pro prevenci zdravotních problémů.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo validovat upravenou QuEChERS extrakci s následným UPLC-MS/MS stanovením fipronilu a fipronil sulfonu v vejcích podle SANTE/11945/2015. Metoda má zajistit limity stanovení výrazně pod EU MRL 0,005 mg/kg pro součet obou látek.

Použitá instrumentace

• ACQUITY UPLC I-Class (Waters) s FTN autosamplerem
• Kolona ACQUITY UPLC HSS T3, 1.8 µm, 2.1×100 mm
• Mass spectrometer Xevo TQ-XS s ESI zdrojem
• Oasis PRiME HLB syringe cartridge pro pass-through clean-up
• DisQuE QuEChERS extrakční sady
• MassLynx a TargetLynx XS software

Použitá metodika

Vzorky homogenizovaných vajec byly extrahovány acetonitrilem ve vodném prostředí s QuEChERS solemi. Následovalo odstředění, pass-through čištění na Oasis PRiME HLB kartáčce a analýza UPLC-MS/MS. Chromatografická separace probíhala během 8,5 minuty s gradientem amonného acetátu a acetonitrilu. Kvantifikace využila metodu MRM se dvěma přechody pro každou látku.

Hlavní výsledky a diskuse

Validace dle SANTE přinesla LOQ 0,002 mg/kg pro obě sloučeniny a linearitu r2 > 0,999. Průměrné recovery dosahovalo 95 % (RSDr 1,2 %) pro fipronil a 96 % (RSDr 1,4 %) pro sulfon. Matriční efekty byly minimální (~2 %) díky účinnému čištění. Filtrace odstranila více než 95 % fosfolipidů, což prodloužilo stabilitu a spolehlivost systému.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje:

• Vysokou citlivost pro screening i potvrzovací analýzu
• Splnění legislativních požadavků EU pro MRL
• Rychlé a nákladově efektivní řešení pro rutinní kontroly
• Snížení údržby LC-MS/MS díky minimalizaci matricových interferencí

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření podobných postupů na další pesticidní rezidua a biologické matrice. Integrace s automatizovanými extrakčními platformami a AI-podporovanými nástroji pro vyhodnocení dat může dále zvýšit throughput a spolehlivost. Multiproxy analýza reziduí ve vaječných produktech i ptačích tkáních bude klíčová pro komplexní monitoring potravinové bezpečnosti.

Závěr

Validovaná metoda modifikovaného QuEChERS s UPLC-MS/MS detekuje a kvantifikuje fipronil a jeho sulfon v vejcích s LOQ 0,002 mg/kg. Splňuje přísné SANTE požadavky a MRL EU, nabízí rychlý, spolehlivý a robustní postup pro rutinní kontroly a laboratorní due diligence.

Reference

• Hird S., Ross E., DeClercq C. et al. Fipronil and Fipronil Sulfone in Eggs: Background and Method of Analysis, LinkedIn, 10. 8. 2017
• EU Commission Regulation No 1127/2014 of 20 October 2014 amending Regulation (EC) No 396/2005
• European Union (2015). SANTE/11945/2015 Guidance Document on Analytical Quality Control and Method Validation for Pesticide Residues Analysis
• EURL for Pesticides in Food of Animal Origin (2017). Analysis of fipronil and metabolites with modified QuEChERS method in egg