Enhancing the LC-MS/MS Analysis of B-group Vitamins with MaxPeak High Performance Surface Technology

Význam tématu

Liquid chromatografie v kombinaci s tandemovou hmotnostní spektrometrií je klíčová pro kvantifikaci vitamínů skupiny B v potravinářství, farmacii i výživě. Silné interakce těchto vitamínů s kovovými povrchy v průtokové cestě mohou způsobit deformované chromatografické píky, nízkou citlivost a pozůstatkovou kontaminaci, což snižuje přesnost a produktivitu laboratoře.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo porovnat výkon systému ACQUITY PREMIER vybaveného technologií MaxPeak High Performance Surfaces (HPS) s běžným UPLC systémem při analýze 18 sloučenin skupiny B vitamínů. Studie vycházela z AOAC Official Method 2015.14 a rozšířila ji o vitaminy B5, B9, B12 a biotin.

Použitá metodika a instrumentace

Analýza probíhala za podmínek stanovených AOAC pro simultánní stanovení B1–B6 a doplněna o dalších vitaminy:

• ACQUITY PREMIER System s povrchy MaxPeak HPS
• ACQUITY PREMIER BEH C18 Column (1,7 µm, 2,1×100 mm)
• ACQUITY UPLC H-Class PLUS System a konvenční BEH C18 Column
• Xevo TQ-S micro MS System v režimu MRM

Hlavní výsledky a diskuse

V porovnání s běžným systémem HPS technologie přinesla:

• Výrazné navýšení odezvy pro flavin mononukleotid, thiamin, thiamin pyrofosfát, pyridoxal-5′-fosfát a kyselinu pantothenovou
• Ostré, symetrické chromatografické píky s menším tailingem
• Zlepšení limitu kvantifikace až 3–10násobně pro vybrané vitaminy
• Eliminaci carry-over u riboflavinu, pyridoxinu, 5-methyl-tetrahydrofolátu a methylkobalaminu

Přínosy a praktické využití metody

Nasazení MaxPeak HPS významně zvyšuje citlivost, přesnost a opakovatelnost stanovení vitamínů skupiny B. Umožňuje spolehlivou kvantifikaci při nižších koncentracích, zkracuje dobu údržby a minimalizuje nutnost doplňkových přístrojových úprav.

Budoucí trendy a možnosti využití

Technologie HPS lze rozšířit na další třídy analytů (peptidy, oligonukleotidy, organické kyseliny) a zavést do vysoce propustných pracovních postupů. Další rozvoj povrchových modifikací povede k robustnější analýze ve složitých maticích a plné automatizaci workflow.

Závěr

Integrace MaxPeak HPS do platformy ACQUITY PREMIER poskytuje výrazné zlepšení chromatografického výkonu a spolehlivosti LC-MS/MS analýzy vitamínů skupiny B, což přispívá k přesnějším a efektivnějším laboratorním procesům.

Reference

1. Wakamatsu A., Morimoto K., Shimizu M., Kudoh S. A severe peak tailing of phosphate compounds caused by interaction with stainless steel used for liquid chromatography and electrospray mass spectrometry. J. Sep. Sci., 2005, 28, 1823–1830.
2. Asakawa Y., Tokida N., Ozawa C., Ishiba M., Tagaya O., Asakawa N. Suppression effects of carbonate on the interaction between stainless steel and phosphate groups of phosphate compounds in high-performance liquid chromatography and electrospray ionization mass spectrometry. J. Chromatogr. A, 2008, 1198–1199, 80–86.
3. Lauber M., Walter T. H., DeLano M., Gilar M., Boissel C., Smith K., Birdsall R., Rainville P., Belanger J., Wyndham K. Low adsorption HPLC columns based on MaxPeak High Performance Surfaces. Waters White Paper, 720006930EN, 2020.
4. Birdsall R. E., Kellet J., Ippoliti S., Ranbaduge N., Shion H., Yu Y. Q. Increasing chromatographic performance of acidic peptides in RPLC-MS-based assays with ACQUITY PREMIER featuring MaxPeak HPS Technology. Waters Application Note, 720007003EN, 2020.
5. Boissel C., Walter T. H. Improved peak shape and wide selectivity range with ACQUITY PREMIER Columns. Waters Application Note, 720007014EN, 2020.
6. Smith K. M., Rainville P. Utilization of MaxPeak High Performance Surfaces for improved separation and recovery of analytes associated with the tricarboxylic acid cycle. Waters Application Note, 720006727EN, 2020.
7. Brennan K., Lame M. L., Donegan M., Rainville P. D. Improved oligonucleotide SPE-LC-MS analysis using MaxPeak High Performance Technology. Waters Application Note, 720007019EN, 2020.
8. AOAC INTERNATIONAL. Official Methods of Analysis, 21st Ed., Method 2015.14, 2019.