FOOD TESTING - ACQUITY QDa MASS DETECTOR APPLICATION NOTEBOOK

Význam tématu

Patulin je mykotoxin vznikající na nakřehčených jablcích infikovaných plísněmi rodu Penicillium, Aspergillus nebo Byssochlamys. Jeho termostabilita zajišťuje přežití při pasterizaci moštu a jeho konzumace je spojována s toxicity až hematologickými poruchami. Regulace Evropské unie a americké FDA stanovily maximální hranici 50 µg·kg^–1 pro jablečné šťávy, přičemž pro výrobky určené dětem platí ještě nižší limit 10 µg·kg^–1.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout rychlou, citlivou a selektivní metodu pro jednoznačnou detekci a kvantifikaci patulinu v jablečných šťávách pod stanovenými limity. Metoda kombinuje vzorkování pomocí SPE Oasis HLB, chromatografii UPLC BEH Shield RP18 a detekci jednopolohovým SIR na ACQUITY QDa, doplněnou plnospektrálními daty RADAR™.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorek: pasterizovaná jablečná šťáva, odtučněný a filtrován.
• SPE Oasis HLB: odtučnění hexanem, precipitace 70 % acetonitrilem, eluční postup včetně kyselých a zásaditých výplachů, eluce ethylacetát/MTBE.
• Chromatografie: ACQUITY UPLC H-Class, kolona BEH Shield RP18 1,7 µm, 2,1 × 100 mm; gradient 99 % A/1 % B → 10 % A/90 % B → zpět do 99 % A; tok 0,6 mL/min, 40 °C.
• Detekce: ACQUITY QDa, ESI(–), SIR m/z 152,9 (patulin), m/z 124,8 (HMF), cone 15 V, plnospektrální data RADAR.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje kvantifikovatelné citlivosti 5 µg·kg^–1 (S/N≥10), tedy 10× pod požadavky EU/US. Linearita SIR signálu byla v rozmezí 5–200 µg·kg^–1 s r² > 0,999. Matricové potlačení bylo ~10 %. Bez falešných pozitiv u slepých vzorků. Padesátinásobná replikovaná injekce při 5 µg·kg^–1 vykázala RSD 9 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Jednokroková příprava vzorku, jednoduché SPE bez derivatizace.
• Detekce výrazně selektivnější než UV/VIS, eliminovány interference HMF.
• Rychlý cyklus analýzy 5 min vs. 20+ min u konvenčních LC-UV metod.

Budoucí trendy a možnosti využití

Implementace ACQUITY QDa do rutinních laboratoří umožňuje levné rozšíření LC-MS screeningů. RADAR ověřuje čistotu pozadí plnospektrálními daty. Metodiku lze rozšířit na současné i nové mykotoxiny v různých matricech ovoce a džusů.

Závěr

Popsaná UPLC-QDa metoda splňuje požadavky na kvantifikaci patulinu v jablečných šťávách i výrobcích pro děti pod regulačními limity. Poskytuje rychlé, robustní a vysoce selektivní řešení pro potravinářské laboratoře.

Reference

1) FDA Interim Patulin Analysis, 2007. 2) EU Reg. 1881/2006; 1129/2011. 3) Morphet J., Waters App. Note 720002410en, 2008. 4) EU Dir. 2002/657/EC.