A novel approach to the analysis of multivitamin by online supercritical fluid extraction/supercritical fluid chromatography

Význam tématu

Fat-rozpustné vitaminy jsou nezbytné pro řadu biologických funkcí, avšak jejich vysoká hydrofobita komplikuje rychlou a přesnou analýzu. Standardní techniky (RP-HPLC, NP-HPLC, GC) vyžadují různorodou přípravu vzorků, což omezuje efektivitu a reproducibilitu.

Cíle a přehled studie / článku

Studie si klade za cíl vyvinout inovativní online kombinaci superkritické fluidní extrakce (SFE) a superkritické fluidní chromatografie (SFC) pro simultánní kvantifikaci vitaminů A (acetát, palmitát), E (acetát) a D (D2, D3) v lécích a potravinových doplňcích.

Použitá instrumentace

• Nexera UC Online SFE-SFC systém (moduly SFE-30A, LC-30ADSF, LC-20ADXR, DGU-20A5, CTO-20AC, SFC-30A×2, SPD-20A, CBM-20A a software LabSolutions Ver5.8)

Použitá metodika a postup

Příprava vzorků spočívala v rozpuštění standardů (VAA, VAP, VEA, VD2, VD3) v n-hexanu a přípravě reálných vzorků z kapslí, tablet či želatinových perel. SFE proběhla při 50 °C, 14,8–15 MPa, statickém extrakčním čase 3 min a dynamickém čase 3 min při přídavku 5 % methanolu. SFC separace proběhla na sloupci ODS-P (4,6×250 mm, 5 μm) s gradientem CO₂/MeOH, teplotou 40 °C, tlakem 10 MPa a UV detekcí při 325 a 284 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Extrakcí se dosáhlo výtěžnosti >85 % pro všechny vitaminy. Chromatografické špičky byly dobře rozlišené. Kalibrační křivky vykazovaly linearitu s R²=0,997–0,999 v rozsahu 2,8–112,1 μg. Opakovatelnost retence byla 0,04–0,24 % RSD a ploch špiček 4,1–13,0 % RSD. Recovery dosáhly 90,5–101,1 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje simultánní analýzu pěti vitaminů bez nutnosti samostatných postupů, čímž zkracuje dobu analýzy, zvyšuje automatizaci a zajišťuje vysokou reprodukovatelnost. Je vhodná pro rutinní QC v farmaceutickém a potravinářském průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit o hmotnostní spektrometrii pro vyšší selektivitu, aplikovat na další bioaktivní látky nebo miniaturizovat pro vyšší propustnost vzorků. Superkritická fluidní platforma podporuje principy zelené analytické chemie.

Závěr

Online SFE-SFC metoda umožňuje rychlou, spolehlivou a plně automatizovanou simultánní kvantifikaci vitamínů A, D a E, přinášející výhody z hlediska efektivity, reprodukovatelnosti a udržitelnosti.