Agilent 6230 time-of-flight LC/MS system

Význam tématu

Time-of-Flight LC/MS je moderní analytická metoda, která umožňuje přesné měření poměru hmotnosti k náboji (m/z) s vysokým rozlišením. Tato technologie zvyšuje důvěru v identifikaci látek v komplexních vzorcích nad rámec konvenční HPLC UV či kvadrupólové MS detekce a nachází uplatnění v oblasti farmacie, metabolomiky, environmentální analýzy i biotechnologií.

Cíle a přehled studie / článku

Článek představuje platformu Agilent 6230 LC/TOF a demonstruje její schopnosti v:

• přesné identifikaci malých metabolitů a velkých biomolekul
• automatizovaném ladění parametrů pomocí SWARM autotune
• plnospektrální datově nezávislé akvizici (All Ions)
• retrospektivní analýze dat bez nutnosti opakované injekce vzorku

Použitá metodika a instrumentace

Pro získání dat byly využity následující prvky:

• Agilent 6230 time-of-flight LC/MS systém s vysokým rozlišením
• SWARM autotune pro optimalizaci nastavení jedním klikem
• MassHunter Walkup software pro automatizované workflow a reporting
• All Ions režim pro Data-Independent Acquisition
• Agilent Jet Stream technologie pro tepelnou fokusaci a zvýšení citlivosti
• MassHunter BioConfirm pro analýzu intact proteinů a výpočet DAR u ADC

Hlavní výsledky a diskuse

Testy prokázaly:

• vysokou citlivost a rozlišení při detekci malátu (m/z 133,0137) s významným zlepšením oproti klasickému ladění
• masovou přesnost reserpinu na úrovni řádově jednotek ppm a excelentní izotopovou fidelitu
• detekci GTP (C10H16N5O14P3) s odchylkou méně než 0,4 ppm
• analýzu intact NIST mAb s rozlišením proteoform a kvalitní dekonvoluční spektroskopií ve vysokém m/z rozmezí
• statistické porovnání počtu možných chemických formulí u kvadrupólu vs. TOF podle hmotnostní přesnosti

Přínosy a praktické využití metody

Implementace LC/TOF do rutinní praxe přináší:

• vyšší jistotu identifikace stopových a koelujících látek
• snadné nastavení metodiky pro uživatele bez hluboké MS expertízy
• možnost zpětné analýzy bez reinjekce vzorku
• široké využití v proteomice, metabolomice, vývoji léčiv i QA/QC laboratořích

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávaný rozvoj se zaměřuje na:

• integrované separační techniky (GC, SFC, CE) pro komplexnější analýzy
• rozšířené knihovny fragmentačních spekter pro All Ions režim
• aplikace strojového učení pro automatizovanou interpretaci spekter
• dálkové sledování a cloudové platformy pro správu plnospektrálních dat

Závěr

Agilent 6230 LC/TOF kombinuje vysoké rozlišení, přesnost měření hmotnosti a uživatelsky přívětivý software SWARM a Walkup. Výsledkem je robustní platforma pro spolehlivou identifikaci malých i velkých molekul s možností retrospektivní analýzy.

Reference

V textu nejsou uvedeny standardní bibliografické odkazy.