Ultra Fast Method Scouting (2) —Maximizing the Efficiency of Method Development

Význam tématu

Vývoj analytických metod je často časově náročný a vyžaduje rozsáhlé testování různých podmínek. Metoda scouting umožňuje systémově a automatizovaně vyhledat optimální kombinace kolony, mobilní fáze a gradientu, což výrazně zkracuje dobu přípravy a minimalizuje riziko omylů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této studie bylo demonstrovat použití Nexera Method Scouting systému v kombinaci s softwarem Method Scouting Solution a funkcí Multi-Data Report v LabSolutions DB/CS pro stanovení optimálních podmínek simultánní analýzy devíti sulfa­amidových antibiotik.

Použitá metodika a instrumentace

• Krokuvý postup vývoje metody: simulace, method scouting, optimalizace gradientu, validace.
• Instrumentace: ultra­výkonný HPLC Nexera X2 (130 MPa), detektor DAD, autosampler, kolony Shim-pack XR-ODS/C8/Phenyl a ekvivalentní třikrát 2,0 µm, zásobníky se schopností automatického míchání až čtyř složek (FCV-34AH).
• Software: Method Scouting Solution pro vytváření a spouštění dávkových analýz, LabSolutions DB/CS s Multi-Data Report a Data Browser funkcemi pro hodnocení výsledků.
• Použité podmínky při scouting: 4 mobilní fáze (fosfátové pufry pH 2,6 a 6,9, acetonitril, methanol), 6 kolon, 24 kombinací, průtok 0,8 mL/min, objem injekce 2 µL, teplota 45 °C, detekce UV při 265 nm, lineární gradient 10→35 % B.

Hlavní výsledky a diskuse

Použitím Multi-Data Report k analýze 24 chromatogramů bylo určeno, že nejlepší rozlišení poskytuje kolona Shim-pack XR-Phenyl s pufrem pH 2,6 a acetonitrilem. Následná optimalizace gradientu ukázala, že počáteční koncentrace 5 % a finální 29 % organické fáze vede k nejvyšší hodnotě evaluačního kritéria. Data Browser umožnil vizuální porovnání jednotlivých chromatogramů pro potvrzení výsledků.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zkrácení času vývoje metod díky automatizaci scouting a reportingu.
• Snížení chybovosti a standardizace analytických procedur.
• Možnost rychlého přepínání mezi různými kombinacemi kolony a mobilní fáze bez ruční přípravy každé varianty.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace se systémy Nexera Quaternary a i-Series pro rozšíření stávajících přístrojových parků o scouting bez nutnosti nákupu nového HPLC.
• Další automatizace a implementace umělé inteligence pro predikci optimálních podmínek už v simulační fázi.
• Rozšíření aplikace na kombinovanou detekci HPLC-MS a další třídy analytických látek.

Závěr

Kombinace Nexera Method Scouting systému, softwaru Method Scouting Solution a LabSolutions DB/CS zefektivňuje a zrychluje proces vývoje analytických metod. Díky automatizovanému testování podmínek, pokročilému reportingu a vizualizaci dat lze rychle nalézt optimální chromatografické parametry s minimální manuální prací.

Reference

1. Technical Report C190-E159: Improved R&D Efficiency Through Speedier Method Development.