Determination of Nitrosamine Impurities in Sartan Drug Products by GC-MS/MS Method

Význam tématu

Aplikace sartanu je klíčová v léčbě hypertenze a srdečního selhání. Během výroby však mohou vznikat nitrosaminové nečistoty, jako jsou NDMA, NDEA a NMBA, které jsou považovány za pravděpodobné lidské karcinogeny. Zjištění těchto látek v sartanových produktech vedly k odvolání řady léčiv a zpřísnění regulačních požadavků ze strany FDA.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo vyvinout a validovat citlivou a spolehlivou GC-MS/MS metodu s přímou injekcí pro simultánní stanovení sedmi nitrosaminů v lécích obsahujících sartanové API, včetně tří látek monitorovaných FDA (NDMA, NDEA, NDBA), a aplikovat ji na čtyři komerční sartanové přípravky.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky sartanových tablet (olmesartan, losartan, irbesartan, valsartan) byly extrahovány dichlormethanem, přidán interní standard NDMA-D6 a extrakty byly filtrované před analýzou.
Instrumentace:

• GC-MS/MS: Shimadzu GCMS-TQ8050 NX s elektronovou ionizací (EI)
• Kolonka: SH-Rxi-624Sil MS (30 m × 0,25 mm, 1,40 μm)
• Program teplot: 38 °C (1 min) → 12 °C/min na 160 °C → 5 °C/min na 200 °C (1 min)
• Injekce: splitless, 2 μl, vzduchotlak 250 kPa
• Carrier gas: helium, konstantní rychlost 42,6 cm/s
• Režim akvizice: MRM (1 kvantitativní a 1–2 kvalitativní přechody)

Hlavní výsledky a diskuse

Linearita metody byla pro všechny analyty v rozsahu 2,5–100 ng/ml (R2 ≥ 0,999). S/N poměry ve standardu 5 ng/ml dosahovaly 323–3511 a opakovatelnost (%RSD) byla 1,7–5,6 %. Ve všech testovaných lécích nebyly detekovány cílové nitrosaminy. Po analýze vzorků došlo k dočasnému nárůstu šumu na kolonce, který byl eliminován standardní kondicionací.
Instrumentální recoveries a matrix effect se pohybovaly v rozmezí 103–150 %, což dokládá matricové zesílení signálu a doporučuje použití matricově vázané kalibrace pro přesnější kvantifikaci.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé, vysoce citlivé a přesné stanovení nitrosaminů v lécích, splňuje regulační požadavky FDA a je vhodná pro rutinní QC/QA analýzy ve farmaceutickém průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metodiky na další nitrosaminy a typy farmaceutických přípravků
• Automatizace přípravy vzorků a integrace headspace technik
• Implementace matricově vázané kalibrace pro eliminaci matrix efektu
• Vývoj rychlejších kolonek a optimalizovaných MRM přechodů

Závěr

Popsaná GC-MS/MS metoda s přímou injekcí je vhodná pro spolehlivé stanovení sedmi nitrosaminů v sartanových lécích, splňuje kritéria FDA pro citlivost, linearitu a přesnost a je připravena pro rutinní použití.

Reference

1. EMA/44960/2019: Výzva k revizi výrobních procesů s cílem eliminovat nitrosaminové nečistoty.
2. FDA updaty a tiskové zprávy k odvolání valsartanu, losartanu a dalších ARB.
3. FDA Combined Direct Injection NDMA and NDEA Impurity Assay by GC/MS.