Bazické analyty a výhody modifikovaných silikátových nosičů v kapalinové chromatografii na reverzní fázi

Stacionární fáze na bázi oxidu křemičitého jsou v současnosti nejčastěji používanými fázemi v kapalinové chromatografii. Tradiční kolony C18 často vykazovaly špatný tvar píku (tailing) u bazických analytů při nízkém pH, stejně jako omezenou stabilitu v důsledku postupné hydrolýzy silanů při vysokém pH. Díky technologiím křížového propojování a end-cappingu se podařilo výrazně zlepšit jak omezenou stabilitu, tak i nežádoucí sekundární interakce siliky.

Nejnovějším pokrokem v oblasti analýzy bazických analytů při nízkém pH je výroba C18 kolon se zbytkovým kladným nábojem na silikátovém nosiči. Tato kombinace umožňuje použití 100% vodné mobilní fáze, čímž se zvyšuje retence bazických sloučenin. Zároveň dochází k minimalizaci (iontových) sekundárních interakcí mezi kladně nabitými bázemi a silanolovými skupinami díky elektrostatickému odpuzování na povrchu siliky. Výsledkem je, že bazické sloučeniny lze zadržet a eluovat s dobrým tvarem píků i za kyselých podmínek, které jsou obecně preferované. Obrázek 1 ukazuje příklad zlepšeného tvaru píku chlorfeniraminu, bazického antihistaminika, na koloně Kinetex™ PS C18 využívající tuto technologii.

Phenomenex: Bazické analyty a výhody modifikovaných silikátových nosičů v reverzní kapalinové chromatografii: Obrázek 1. Zlepšená retence v reverzní fázi a tvar píku chlorfeniraminu na koloně Kinetex PS C18.

Phenomenex: Bazické analyty a výhody modifikovaných silikátových nosičů v reverzní kapalinové chromatografii: Obrázek 2. Analýza nikotinu a dalších metabolitů pomocí kolony Kinetex EVO C18.